杨学丽 路三军 魏娉 安欣 尹峰 孙健

    ·论著·

    DKK-1和β-catenin在近端胃腺癌中的表达及临床意义

    杨学丽 路三军 魏娉 安欣 尹峰 孙健

    目的探讨DKK-1(Dickkopf-1)和β-catenin 在近端胃腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP 法检测61 例近端胃腺癌组织中DKK-1 和β-catenin 表达情况，并结合近端胃腺癌的临床病理特征进行分析。结果在61 例近端胃腺癌组织中，DKK-1 阳性表达率和β-catenin 异常表达率分别为34.4%(21/61)和68.9%(42/61)。DKK-1的表达在肿瘤的分化程度、临床分期及淋巴结转移方面差异有统计学意义(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 61例近端胃腺癌石蜡组织标本取自2011年5月至2012年6月我院病理科，患者术前均无放化疗史；其中男45例，女16例；年龄42～80岁；平均年龄63.7岁；肉眼观察肿瘤主体位于胃上部，且未侵及食管；肿瘤侵及浅肌层9例，侵及深肌层32例，侵及浆膜层20例；其中高分化癌12 例，中分化癌34 例，低分化癌15 例；其中Ⅰ/Ⅱ期28 例，Ⅲ/Ⅳ期33 例；无淋巴结转移25 例，有淋巴结转移36 例。临床病理分期以术后病理为依据，按照美国癌症联合会(AJCC) 制定的TNM分期方案；组织学分类采用世界卫生组织发表的“国际肿瘤组织分类”。

    1.2 主要试剂 兔抗人DKK-1 多克隆抗体购自美国Santa Cruz 生物技术公司，兔抗人β-catenin 多克隆抗体、SP 免疫组织化学试剂盒及DAB 显色剂均购自迈新生物技术公司。

    1.3 方法 将制备好的石蜡组织切片常规脱蜡，微波修复抗原，3%过氧化氢溶液以阻断内源性过氧化物酶活性。正常山羊血清封闭，分别滴加一抗为兔抗人DKK-1 多克隆抗体(1∶50)和兔抗人β-catenin 多克隆抗体(1∶100)，37℃孵育2～3 h后依次滴加山羊抗兔二抗，辣根酶标记链霉卵蛋白素。DAB显色，苏木精复染，脱水、透明、封固。以上试验以PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性切片作为阳性对照。

    1.4 结果判定 免疫组织化学阳性反应物为棕黄色颗粒。每张切片随机选取5 个高倍视野，每个视野计数200 个癌细胞，计数阳性细胞百分比。DKK-1 阳性表达定位于胞浆，偶有细胞核表达，根据染色程度评分，无着色为0 分，浅黄色为1 分，棕黄色为2 分，棕褐色为3 分；阳性细胞百分比 ......