郭秀芳

    目前，Ki67与临床病理指标检测的关系研究仍有不同结论[1]。CD147蛋白能够介导细胞间的黏附，免疫球蛋白超家族的跨膜蛋白的产生来促进基质的降解[2]。2008至2012年，我们采用免疫组织化学染色方法检测了乳癌组织标本中CD147蛋白、Ki67表达，探讨两者的相关性。

    1 材料与方法

    1.1 材料 手术切除乳腺癌标本78份，所有患者术前均未做放疗、化疗等抗肿瘤治疗。78例中年龄25～71岁;组织学分类和分化程度依据2000年世界卫生组织标准，所有标本均经10%中性缓冲甲醛固定24 h，石蜡包埋后3 μm厚连续切片，备做HE及免疫组织化学染色。

    1.2 免疫组化方法 (1)烤片，烤箱62℃，2 h，二甲苯脱蜡40 min，无水乙醇、95%、85%、75%梯度乙醇10 min;(2)3%过氧化氢5 min以消除内源性过氧化物酶活性;将载玻片浸泡于PBS(pH值=6.0)中，高温高压抗原修复2.5 min;(3)10%正常山羊血清工作液封闭;滴加稀释的兔抗人Ki67抗体(稀释比1∶100)、CD147蛋白抗体(稀释比1∶100)，4℃孵育过夜;(4)滴加二抗工作液37℃反应1 h;(5)DAB显示，苏木素复染细胞核、脱水，中性树脂封片，观察实验结果。将已知乳腺癌组织阳性切片结果作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。

    1.3 评分标准 观察染色强度和阳性细胞百分率，染色强度:无染色为1分，中染色为2分，强染色为3分。阳性细胞百分率评分:<5%为0分，5% ～24%为1分，25% ～49%为2分 ......