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编号:281129
梅毒螺旋体实验室检测方法研究进展
http://www.100md.com 2014年4月2日 河北医药 2014年第23期
抗原,1病原体的检测,2梅毒血清学检查,3分子生物学技术
     王宪灵 王缚鲲

    梅毒危害极大,在我国曾一度被消灭,但随着近年来对外交流的日益频繁又死灰复燃,发病率呈逐年上升趋势。2012年国家卫生部公布的甲、乙类法定报告传染病中,梅毒发病率较2011年上升3.27%,死亡率上升5.36%,应引起重视。因此早期检出患者,及时治疗,控制传染源,是控制梅毒传播的重要措施。梅毒检测方法有多种,现就梅毒螺旋体的实验室常见的诊断方法作一简要综述。

    1 病原体的检测

    对患者分泌物进行观测,如发现运动的苍白螺旋体即可确诊为梅毒,该方法特异性高,但灵敏度稍低,容易漏检。梅毒检测适用于早期梅毒皮肤黏膜损害,对硬下疳尤为重要,因为人体感染TP 3~6周后,才能通过梅毒螺旋体抗原血清试验(TPHA)、梅毒荧光抗体(FTA)等敏感性、特异性较高的方法检测到血清中的抗体[1],在患者血清抗体达到可测水平之前,TP检查是早期诊断梅毒最好的方法。

    1.1 暗视野显微镜(DF) 检查梅毒螺旋体暗视野检查法是梅毒病原体检测的主要方法。在皮损处,用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液,用500×暗视野显微镜观察,在暗背景上,梅毒螺旋体呈白色发光、运动快速、急促,也可较缓慢地围绕长轴旋转。根据其典型的形态、大小和运动方式,结合临床症状可直接诊断梅毒。暗视野检查法特异性高,适用于早期梅毒的诊断。但由于受病程、取材、检测人员技术水平以及部分患者不规则使用抗生素导致TP数量减少和活动力下降的影响,敏感性较低为54.4%[2],因此此法检查阴性也不能排除患梅毒的可能。该法简单、快速,但不适用于潜伏及晚期梅毒患者。且口腔中可能存在其他螺旋体,因此此法对口腔病灶材料亦不适用。

    1.2 活体组织检查梅毒螺旋体 常用银染色法(warthin-starry)或直接荧光抗体试验(DFAT)检查活体组织梅毒螺旋体。银染色法能使梅毒螺旋体染成棕褐色或黑褐色,形态清晰易辩,且标本可以永久保存。但由于存在梅毒螺旋体类似物质的干扰,因此,银染色阳性结果的判断应慎重。特异性荧光抗体试验是用非致病性螺旋体培养物对抗梅毒螺旋体抗血清或单克隆抗体吸收后,再与异硫氰酸荧光素(FITC)相结合,在荧光显微镜下判读结果。梅毒螺旋体发特异性黄绿色荧光,灵敏性稍高于暗视野检查法。可用于梅毒螺旋体与类似螺旋体的鉴别。

    1.3 多功能超高倍显微诊断仪(MDI) 是一种集光学、光电学、电子学、医学影像学和多媒体计算机技术于一体的高科技医学显微设备,其具有共轭变焦、高清晰度、高分辨率、高放大倍率的特点,有效放大倍率可达20 000倍以上。可以快速、便捷的进行标本观测 ......

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