李婧 杨香敏 宋巧 卢海丽 陈娜 史万英

    再灌注严重的缺血肢体后，该肢体的损伤反而会加重，甚至引发其他远隔器官的损伤，该现象为缺血再灌注(ischemia reperfusion，IR)损伤，心肌是对缺血较为敏感的组织之一。肢体IR过程产生的大量活性氧物质和炎性介质，进而使中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil，PMN)在心大量扣押，这是肢体IR后心肌损伤发生的中心环节。血红素氧合酶-1(HO-1)是近来发现的一种可被氧化应激和炎性反应所激活、并对机体具有保护作用的热休克蛋白，其催化产物一氧化碳(CO)具有抗炎性、抗氧化损伤等重要功效。本文主要研究外源性CO对于肢体IR所致缺血肢体的作用，并初步探讨其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 实验中，22只8个月大SD雄性大鼠(清洁级)，体重220～250 g，由河北省实验动物中心提供(动物许可证号，冀504085)，随机分3组，2只为假手术组(S组);10只为IR组;10只为IR吸入CO组(RC组)。

    1.2 方法 隔离暴露3组右后肢股动脉根部，采用无创血管夹交紧，并把创口进行缝合，用止血带绑扎右后肢根部，造成大鼠肢体缺血。实验4 h后，除去血管夹和橡皮筋，并灌注48 h，以复制大鼠肢体IR模型。手术后4 h开始进行RC组，让大鼠持续吸入含有CO(500 ppm)的医用空气4 h，每间隔12 h后再吸入4 h，连续进行3次，共12 h;IR组和S组均在正常空气中呼吸。实验后，逐一检查各心肌组织学及横纹改变情况，应用流式细胞仪检测肌组织中Bax、Bcl-2及凋亡百分比的值;应用全自动生化分析仪检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和血清乳酸脱氢酶(LDH)表达的变化 ......