王卫霄 姚苗苗 吕艳茹 杜晓欣 张晓静 赵素芬

    ·论著·

    灵芝孢子粉抑制人卵巢癌细胞增殖及诱导凋亡的体外研究

    王卫霄 姚苗苗 吕艳茹 杜晓欣 张晓静 赵素芬

    目的研究灵芝孢子粉对人卵巢癌OV2008细胞增殖及凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法采用WST-1比色法及显微镜观察法研究灵芝孢子粉对OV2008细胞生长抑制作用及细胞形态的改变;流式细胞仪检测细胞周期分布情况;Hoechst-33258染色方法评估细胞凋亡并采用western blot方法测定凋亡相关蛋白的表达。结果WST结果表明灵芝孢子粉可以抑制OV2008细胞的生长，并呈剂量和时间依赖性;流式细胞术结果提示灵芝孢子粉可使卵巢癌细胞生长阻滞于G1期。Hoechst-33258染色结果显示灵芝孢子处理细胞后可以检测出凋亡细胞。Western blot方法检测到凋亡抑制蛋白bcl-2、bcl-xl随灵芝孢子浓度增加而下降，而促凋亡蛋白bax及P27、casep具有抑制卵巢癌细胞生长及诱导凋亡的作用，其机制是作用于细胞周期的ase-3逐渐升高。结论灵芝孢子粉可以抑制卵巢细胞生长，使细胞生长阻滞于G1期，并可以通过上调bax、P27，下调bcl-2并活化casepase-3而发挥其作用。

    灵芝孢子粉;卵巢肿瘤;增殖;凋亡;细胞周期

    卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤之一，其治疗以手术和化疗为主。随着治疗手段的提高，患者的生存率和生活质量也得到了一定程度的提高，但由于治疗效果仍不十分理想，其病死率仍居妇科恶性肿瘤之首。因此寻求有效的治疗方法仍然是卵巢癌的研究焦点。目前中药作为卵巢癌辅助治疗手段之一越来越受到重视。灵芝孢子在我国及其他亚洲国家已被公认为治疗

    多种疾病的中药，并且已有大量应用灵芝孢子治疗各种肿瘤的研究报道[1-3]。本研究观察了在不同药物浓度下灵芝孢子对体外培养人卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响，探讨其对人卵巢癌OV2008细胞生长抑制作用的机制，为其在卵巢癌的临床应用提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 仪器:NU2600E型CO2培养箱(ESBE Scientific MC017A1C);超净工作台(Microzone coinporation F40BX/SPZ41);EL340酶标仪(Bio.TEK INSTRUMENTSINS);倒置相差电子显微镜(ZEISS AXIOVERT25);荧光显微镜(NIKON TE2000-U);水浴箱(Fisher Scientific ISOTEMP 210);离心机(SheltonScientific CENTRA CL2);流式细胞仪(BD FACS caliber:BD BIOsciences E97600092) ......