党泽方 李金霞 张秋云 崔利娟 穆凌云 高连印 杜宇琼

    作者单位: 100069北京市，首都医科大学中医药学院首都医科大学络病重点实验室

    截断逆挽方对慢加急性肝衰竭大鼠肝细胞超微结构、周期蛋白Cyclin E及转录因子DP1的影响

    党泽方李金霞张秋云崔利娟穆凌云高连印杜宇琼

    作者单位: 100069北京市，首都医科大学中医药学院首都医科大学络病重点实验室

    【摘要】目的观察截断逆挽方对慢加急性肝衰竭(ACLF)模型大鼠肝细胞超微结构，周期蛋白Cyclin E及转录因子DP-1表达的影响，并考察模型24 h病死率和生存时间，从提高疗效、降低死亡、改善肝细胞超微结构损伤和调控肝细胞代偿性增殖的角度，分析该方干预ACLF的部分疗效和作用机制。方法Wistar大鼠61只，随机分为正常组、模型组及截断逆挽方组。采用猪血清免疫诱导大鼠肝纤维化或肝硬化模型，再给予D-GalN/LPS一次性联合腹腔注射进行急性攻击，建立慢加急性肝衰竭大鼠模型。截断逆挽方组在急性攻击后给予水煎液灌胃连续3 d，模型组和截断逆挽方组大鼠分别在4、8、12 h处死，取肝组织，进行电镜超微结构观察，Elisa法测定Cyclin E及其转录因子DP1的表达，运用IPP 6.0软件进行图像分析，自动计算出阳性物质的IOD值。结果截断逆挽方可以延长模型的存活时间，与模型组比较，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1实验动物Wistar大鼠61只，SPF级，雄性，体重120～150 g，购自中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心，动物合格证号: SCXK-(军) 2007-004。饲养于首都医科大学实验动物科学部屏障设施动物实验房，实验室合格证号: SYXK(京) 2005-0022。IVC大鼠自动换气饲养系统，分笼饲养，每笼3只，自由进食饮水。温度(23.0±1.0)℃，相对湿度(45.0±1.0) %，每隔12 h开灯照明。动物垫料和喂养饲料由动物房提供，经高温消毒后传递到实验室，动物饮用水由动物房水处理系统处理成酸化水后给动物饮用。

    1.2药品截断逆挽方:由苦味叶下珠30 g、瓜蒌30 g、金钱草30 g、生黄芪30 g、槲寄生30 g、三七6 g、莪术6 g、丹参20 g、生地20 g、黑附片15 g(先煎)组成。所有药材均购自北京同仁堂中医医院中药房，经过生药鉴定确认后由首都医科大学中医药学院实验中心煎制，含生药量为4.34 g/ml，4℃冰箱冷藏保存备用，使用时微温。

    1.3试剂猪血清:北京元亨圣马生物技术研究所 ......