罗文彦 成媛 胡蔼园 左连富 何丽英

    作者单位: 050200石家庄市，河北中医学院基础医学院病理学教研室(罗文彦、成媛)，组织胚胎学教研室(胡蔼园)，人体解剖学教研室(何丽英) ;河北医科大学肿瘤研究所(左连富)

    食管鳞状细胞癌中DMBT1和CD44v6的表达及意义

    罗文彦成媛胡蔼园左连富何丽英

    作者单位: 050200石家庄市，河北中医学院基础医学院病理学教研室(罗文彦、成媛)，组织胚胎学教研室(胡蔼园)，人体解剖学教研室(何丽英) ;河北医科大学肿瘤研究所(左连富)

    【摘要】目的探讨食管鳞状细胞癌组织中抑癌基因DMBT1以及粘附分子CD44v6的表达及与肿瘤生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学方法检测70例食管鳞状细胞癌组织及23例切缘正常组织中DMBT1、CD44v6的表达情况。结果DMBT1、CD44v6在癌组织中的表达减弱或呈阴性。DMBT1的表达与食管鳞状细胞癌组织的分化程度、淋巴结的转移有关(P1 资料与方法

    1.1一般资料随机选取河北医科大学第四医院病理科2004年7月至2005年1月经手术切除的食管癌标本70例，其中男37例，女33例;年龄35～78岁，平均年龄(60±7)岁。所有患者术前均未接受过放疗化疗及免疫治疗。全部病例均经病理医师检查证实为食管鳞状细胞癌，并由两位年资较高的病理科医生，根据1990年WHO食管癌的分级标准将70例食管鳞状细胞癌分为高、中、低分化三级，其中高分化鳞癌2例，中分化鳞癌29例，低分化鳞癌15例;有淋巴结转移32例，无淋巴结转移38例;侵及肌层的鳞癌14例侵及外膜层的鳞癌56例。同时取距肿瘤≥5 cm的正常食管黏膜组织23例作对照。术后立即取材，以4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，片厚4 μm，共3张，用于常规HE染色并行组化检测。

    1.2试剂第一抗体DMBT1(H-130) sc-28239兔多克隆抗体由美国Santa Cruz公司出品，CD44v6单克隆抗体和SP-900通用型工作试剂盒均购买于北京中杉生物技术有限公司。

    1.3染色方法采用免疫组织化学S-P法。切片经常规脱蜡，用3%过氧化氢去除内源性过氧化物酶的活性，微波炉抗原修复。组化染色按S-P试剂盒提供的说明书进行。用已知阳性切片作对照，用PBS液代替一抗作为阴性对照。

    1.4结果判断根据参考文献[2]的方法，DMBT1以细胞浆内出现棕色颗粒判断为阳性，对每张切片随机选取5个高倍视野，每个视野计数200个细胞，共计1 000个，计数阳性细胞并计算其所占比例:阳性细胞<5% ......