王恒 邵恩得 张金荣

    近几年来颅内炎性损伤，特别是白细胞在继发脑损伤中的作用，日益受到重视。白介素-8(IL-8)作为中性粒细胞趋化的关键因子，参与了中枢神经系统许多疾病的病理损害过程。本研究通过动态观察实验性大鼠急性颅脑损伤后IL-8在颅内的表达变化及脑含水量情况，探讨IL-8在脑损伤后脑组织继发性损伤中的作用，以期为脑外伤的治疗提供新的方法和思路。

    1 材料与方法

    1.1 动物分组与模型制备 健康成年SD大鼠70只，体重250～300 g，雌雄不限(由河北医科大学动物实验中心提供)，随机分为对照组和脑损伤后12、24、72、120 h，7、14 d组，每组 10 只大鼠。采用液压打击致伤法制作大鼠急性脑损伤模型，对照组大鼠只行颅骨开窗，不做液压打击。将各组动物按时间点断头处死，取挫伤灶前缘2 mm处脑皮质经4%多聚甲醛固定、脱水、包埋，用免疫组化方法观察脑挫伤后大鼠脑组织IL-8的表达情况。另取挫伤灶边缘(200±50)mg脑皮质，用干湿重法测量脑含水量。

    1.2 免疫组化检测IL-8 将包埋好的大鼠挫伤脑组织标本切成厚4μm切片，采用SP免疫组化染色法观察IL-8的表达(IL-8抗体购自武汉博士德公司)。DAB镜下显色，细胞内出现棕黄色颗粒为阳性结果。于显微镜下随机取5个视野摄像，采用Image-proplus 5.0图像分析系统测定阳性区域平均光密度值。

    1.3 脑含水量测定 6组实验大鼠按时间点断头处死后立即开颅，取脑挫伤灶边缘约2 mm处脑皮质约(200±50)mg，用滤纸吸干表面水分，放在铝箔上用电子天平称湿重，然后置恒温干燥箱内，100℃烘烤24 h，取出秤干重后计算脑组织含水量 ......