房颤患者miR-208及IL-18的表达及相关性研究
性反应,内径,心房,1资料与方法,2结果,3讨论
陈恩平 邱健 杜丽根心房颤动(房颤)严重威胁人类的健康和生命,其发病率、致残率高、危害大。目前其病理生理学机制尚未完全明确。目前miRNA与心脏的相关性成为研究的热点之一[1,2]。新发现的 miRNA-208具有心肌表达特异性,在调节的心肌生长中起重要作用,与心肌纤维化密切相关[3,4]。IL-18 在炎性反应中起重要作用[5,6]。本文研究通过观察房颤患者miR-208及炎性因子IL-18的变化,分析miRNA-208与IL-18及房颤相关性,探讨房颤的发生机制,这对于房颤未来的诊疗策略提供理论和实验依据,提供新思路有重要临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2013年8月至2014年8月龙岗区第二人民医院住院的房颤患者99例(房颤组),男49例,平均年龄(56.5±5.6)岁;同期体检中心体检健康志愿者29例(对照组),男15例,平均年龄(57.26±5.92)岁。按照2006年《美国心房颤动治疗指南》将房颤组分为阵发性房颤、持续性房颤及永久性房颤3个亚组。排除标准:房颤病史不明、恶性肿瘤、近期感染、结缔组织病、自身免疫病、帕金森综合征及严重肝、肾功能不全患者。所有研究对象均自愿参加并签署了知情同意书。
1.2 方法 (1)临床资料:完善所有研究对象心血管流行病学问卷及一般临床资料,包括性别、年龄、既往史、吸烟史等。所有研究对象心脏彩超检查由龙岗区第二人民医院超声科专人实施。(2)标本采集:入院首日采晨时空腹12 h以上肘静脉血,测定血脂、血糖等,并留取空腹血4 ml,按照美国MRC公司RNA提取试剂盒说明离心取血清,储存于-80℃冰箱中待测血清miRNA浓度及酶联免疫法检测IL-18水平。(3)实验室检测:应用罗氏全自动生化仪(瑞士)测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酐(Cr)、hs-CRP、B 型利钠肽(BNP)。
1.3 血清miR-208表达水平检测 以U6为内参,采用染料法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测(日本Takara公司反转录及荧光定量试剂盒;广州锐博公司特异性茎一环引物,上、下引物及U6;瑞士罗氏公司Light—CyclerSoftware 1.5荧光定量PCR仪),所有样本的检测均采用同一批次试剂盒,并在同一台仪器及相同的条件下进行。
1.4 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件,计量资料以表示,采用t检验,多组比较采用单因素方差分析,组间两两比较用LSD-t检验 ......
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