李美艳 程利芳 陈辉 陈永学 呼君瑜 石媛媛 宋春丽 马利辉 焦茹

    肿瘤的增殖、侵袭、转移是一个多因素参与、多阶段的复杂过程，与多种细胞因子有关[1]。绝大多数子宫内膜癌为雌激素依赖性肿瘤，与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)关系密切。Maspin 作为抑癌基因，Maspin 的低表达也在子宫内膜的发生发展中起到一定的作用。uPA 为一种丝氨酸蛋白酶，通过细胞外基质的降解，导致肿瘤细胞的脱离、迁徙及侵袭，为子宫内膜癌的转移创造条件。本研究应用免疫组化SP 法检测Maspin、uPA、ER、PR 蛋白在子宫内膜癌中的表达情况及其相关性，以期了解Maspin、uPA 在子宫内膜癌发生、发展、浸润、转移中的作用及与雌、孕激素受体之间的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2004 年6 月至2014 年6 月在邯郸市中心医院病理科存档的子宫内膜癌患者组织蜡块50 例，按2009 年FIGO 标准进行分类，Ⅰ期24 例，Ⅱ期17 例，Ⅲ期7 例，Ⅳ期2 例;高分化(G1)22 例，中分化(G2)18 例，低分化(G3)10 例;肌层浸润深度<1/2 肌层31 例，≥1/2 肌层19 例;伴有淋巴转移10例，无淋巴转移40 例。另取同期因妇科疾病诊刮或切除子宫的内膜标本:不典型增生的子宫内膜50 例，正常增殖期子宫内膜30 例。子宫内膜癌患者年龄30 ～75 岁，平均年龄49.03 岁，95%CI(44.50，54.20)岁。所有病例术前均无放疗、化疗或雌、孕激素使用史，无手术禁忌，且临床资料及病理资料完整。

    1.2 主要实验试剂 Maspin 一抗为兔抗人多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)，uPA 一抗为鼠抗人单克隆抗体(即用型)(福州迈新生物技术有限公司)，SP 广谱超敏试剂盒、PBS 缓冲液、DAB 酶底物显色剂均购自福州迈新生物技术公司。

    1.3 实验方法 每例标本经常规甲酸固定，石蜡包埋，连续组织切片成4 μm 的切片，分别进行HE 染色和免疫染色，以PBS 缓冲液代替一抗作阴性对照，操作步骤按产品说明书进行。

    1.4 结果判定 采用双盲法观察结果，高倍镜下选择10 个高倍视野，计数100 个细胞，计算其平均阳性百分率。Maspin、uPA 阳性为细胞内出现棕黄色均匀颗粒，以胞浆为主，部分胞核表达。ER 阳性、PR 阳性均定位于细胞核，若同时可见胞浆着色的细胞，以细胞核出现明显棕黄-棕褐色颗粒为阳性细胞，而胞浆出现棕黄色为非特异性染色。根据着色强度和面积进行综合评分:(1)着色强度:0 分为无色 ......