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编号:280171
含L-精氨酸库存血对大鼠红细胞的影响及对离体血管调节作用的研究
http://www.100md.com 2015年1月20日 河北医药 2015年第14期
血液,1材料与方法,2结果,3讨论
     卢志芬 曹俊霞

    L-精氨酸(L-Arg)为一种碱性氨基酸,可参与体内的多种代谢过程,其中L-Arg作为底物可生成NO,能抑制血小板聚集和黏附,降低血黏度,减少栓塞的发生;L-Arg还有类似硝酸脂类药的作用,对于离体的血管具有调节其舒张功能的作用,特别是对冠状动脉血管的作用更为明显。而NO对于改善休克后行输血治疗过程中血管应激性损伤作用显著且可靠,因此,L-Arg可能通过改善库存血中NO浓度进而调节患者机体血管功能。本实验主要研究库存血中加入L-Arg后,对大鼠血管功能的调节作用及机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 3个月左右的SD大鼠,其中雄体10只,雌体10只;体重300~400 g,大鼠饲养盒外部温度18~26℃,相对湿度40% ~70%,盒内温度比外部环境高1~2℃,温度高5% ~10%,噪音85分贝以下,氨浓度20 PPm以下,通风换气8~12次/h,添加饲料2次/周,换水2~3次/周,换窝1~2次/周,由中国军事医学科学院实验动物中心提供。经中国军事医学科学院实验动物伦理委员会批准。

    1.2 实验材料

    1.2.1 仪器及试剂:ABL735血气分析仪及配套试剂(丹麦,Radiometer公司);BV-100悬丝流变仪及配套试剂(北京,泰诺德公司);LBY-BX红细胞变形仪(北京,普利生仪器有限公司);550型酶标仪(美国,Bio-Rad公司),Arg(美国,Fluka公司)、血浆游离血红蛋白测定试剂盒(北京,瑞尔达生物科技有限公司)等。

    1.2.2 血液标本:血液由廊坊市中心血站提供。选择4名廊坊市定期无偿献血者,2人为O型,1人为A型,1人为B型,RhD血型均为阳性,均为汉族,年龄30~46岁。抽取静脉血400 ml/人,分装为200 ml/袋,其中一袋用白细胞滤器去除白细胞,分离出红细胞,加入红细胞保养液,制备成悬浮红细胞,放置在4℃血液储存冰箱中。标本留取在严格的无菌条件下进行,按照各检测项目要求,每7天留取1次,进行检测。全部血液和血液制品4℃保存。

    1.3 实验方法

    1.3.1 实验分组:动物随机分为实验组(L-Arg组)和对照组,每组10只。实验组在CPD-A保养液中加入L-Arg,终浓度为3 000 μmol/L;对照组:用等体积的盐水代替L-Arg。

    1.3.2 实验过程:用断头法处死大鼠,取其主动脉血管并剪成3~5 mm长的小段,利用带挂钩的转换器将血管穿在小三角环上,两三角环穿挂血管的两条底边应平行,使力的方向与换能器金属弹片保持垂直并前负荷归零 ......

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