siRNA沉默Her-2/neu基因对胰腺癌BXPC-3细胞COX-2表达及细胞生物学行为的影响
侵袭,增殖,凋亡,1材料与方法,2结果,3讨论
霍华治 苏春永 杨晓光siRNA沉默Her-2/neu基因对胰腺癌BXPC-3细胞COX-2表达及细胞生物学行为的影响
霍华治苏春永杨晓光
【摘要】目的观察siRNA沉默胰腺癌BXPC-3细胞中Her-2/neu基因对COX-2表达及细胞增殖、凋亡、侵袭力的影响,探讨干扰Her-2/neu抑制BXPC-3生物学行为的可能机制,为胰腺癌的临床治疗提供新的思路。方法采用实时荧光定量PCR法(RT-QPCR)和Western blot检测Her-2/neu、COX-2 mRNA和蛋白在胰腺癌BXPC-3细胞及正常胰腺HPDE6C7细胞的表达。设计并构建Her-2/neu siRNA慢病毒表达载体转染BXPC-3细胞,检测Her-2/neu基因沉默对COX-2 mRNA和蛋白表达的影响。CCK-8法检测Her-2/neu siRNA对细胞增殖的影响。流式细胞仪检测Her-2/ neu siRNA对细胞凋亡的影响。Transwell小室实验检测Her-2/neu siRNA对细胞侵袭力的影响。结果Her-2/neu、COX-2 mRNA和蛋白在胰腺癌细胞中均高表达,而在正常胰腺细胞株中极少表达,差异有统计学意义(P<0.05)。Her-2/neu基因沉默能显著抑制COX-2 mRNA和蛋白表达,细胞增殖、侵袭能力显著减弱,细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。结论胰腺癌细胞高表达Her-2/neu、COX-2,Her-2/neu基因沉默能够显著抑制细胞增殖和侵袭能力,并促进细胞凋亡。
【关键词】胰腺癌;原癌基因表皮生长因子;环氧合酶2;基因沉默;增殖;凋亡;侵袭
收稿日期:( 2015-03-19) ( 2015-01-27)
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