硫化氢对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响
脑组织,1材料与方法,2结果,3讨论
孙立新 李国风 骆海坤 张勤增 解丽君 姜红 李立萍 郝娜 张建新脑卒中是导致疾病和死亡的一个重要因素,现已成为继心血管疾病和癌症的第三大死亡原因。脑卒中分为缺血性脑卒中和出性脑卒中两种类型,其中大约80%以上的脑卒中由缺血引起。缺血性脑卒中的发病原因为脑部某动脉供血区的血流因栓塞或出血而暂时或永久地减少导致的脑组织缺血。目前,关于缺血性脑卒中的发病机制正在逐步深入研究[1]。硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)是一种具有臭鸡蛋气味的有毒气体,然而近年来的研究发现,H2S广泛参与机体的多种病理和生理过程,被认为是继一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化碳(carbon monoxide,CO)之后的第三种气体信号分子[2]。研究证实H2S参与了脑缺血性损伤的发生,并认为神经系统内产生H2S的主要酶是胱硫醚-β-合酶(cystathionine-β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸转硫酶(3-mercaptopyruvat sulfur transferase,3MST),并进一步证实3MST是中枢神经系统生成H2S的重要酶[3-5],但对于局灶性脑缺血损伤和H2S/3MST的关系以及H2S对脑缺血损伤的影响报道较少,本研究拟采用复制局灶性脑缺血大鼠模型,观察H2S对局灶性脑缺血损伤的影响。
1 材料与方法
1.1 实验材料 NaHS,2,3,5-三苯基四氮唑兰(TTC),美国Sigma公司;考马斯亮兰试剂盒,南京建成生物工程研究所;α-酮戊二酸,上海试剂三厂;电动匀浆器Silentcrusher M,德国Eppendorf公司;分析天平梅特勒-AE240,瑞士梅特勒公司;全波长酶标仪,美国BIOTEK公司;722分光光度计,上海市第三分析仪器厂;恒温干燥箱,日本SANYO公司;SHA-C恒温水浴振荡器,常州市国华电器有限公司。
1.2 实验动物及分组 健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠80只,体重250~280 g,由河北医科大学实验动物中心提供。大鼠随机分为5组,每组16只,分别为假手术组;缺血模型组;NaHS低剂量组(L-NaHS);NaHS中剂量组(M-NaHS);NaHS高剂量组(H-NaHS)。NaHS低、中、高剂量组分别于大鼠脑缺血3 h 时腹腔注射0.7、1.4 和2.8 mg/kg的 NaHS,假手术组和缺血模型组注射等容量的0.9%氯化钠溶液。各组大鼠均于缺血24 h断头取脑,TTC染色测定脑梗死体积,测定脑组织中H2S含量,改良法测定脑组织3MST的活性 ......
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