陈淑苹 车爱文 谭旭东 李家梁 孔继光

    乳腺癌的发生、发展是一个多因素、多基因参与的错综复杂的过程，在其进展过程中会出现多基因和蛋白表达的异常，其中癌基因的激活和抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础。Maspin和Bmi-1是近年发现的抑癌基因和原癌基因。Maspin是一种肿瘤抑制基因，抑制多种肿瘤细胞活性，且在肿瘤细胞的运动、侵袭以及新生肿瘤性血管形成多环节中均发挥着重要的作用;Bmi-1基因是一种原癌基因，属多梳基因家族成员，参与细胞增殖和肿瘤发生的调控，是与细胞周期和增殖相关的重要转录抑制子。目前多项研究报道Bmi-1在多种肿瘤中高表达，并且与肿瘤的转移和扩散相关[1]。本实验通过免疫组织化学SP法联合检测Maspin和Bmi-1的在乳腺癌组织中的表达情况及临床生物学指标，旨在探讨两者在乳腺癌发生、发展中的作用及其临床意义。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 以我院2010年1月至2014年11月外科手术切除的乳腺标本作为研究对象。通过查阅病例选取浸润癌60例，正常乳腺组织35例，均为女性，年龄25～69岁，中位年龄48岁;患者术前均无放疗、化疗和内分泌治疗。所有标本经10%中性甲醛固定，石蜡包埋4 μm厚切片。

    1.2 免疫组织化学染色 应用免疫组化技术检测标本中Maspin和Bmi-1的表达。鼠抗人Maspin单克隆抗体为美国Neomaker公司的产品，鼠抗人Bmi-l单克隆抗体购自美国Upstate公司，SP免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物技术公司。免疫组化染色采用S-P法，严格按说明书步骤进行实验。以试剂公司提供的阳性对照片作为阳性对照，以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。Maspin以胞质和(或)胞核内出现棕黄色细颗粒为阳性细胞，Bmi-l蛋白阳性表达以细胞核内呈现棕黄色或者棕褐色颗粒为主，少量胞浆内也有棕黄色颗粒;采用半定量积分法，将染色强度分为3级:无着色1分，浅着色2分，棕黄色3分;按阳性瘤细胞的百分比分3级:≤25%为Ⅰ级记1分 ......