王东晖 史春燕 李霞 刘丹彤 高洁凡 冯静 王晓红

    卵巢癌是严重威胁女性生命的恶性肿瘤，目前临床常用治疗手段主要是手术和化疗，而铂类是卵巢癌化疗方案中最常用的药物，但是肿瘤细胞对铂类的耐药性及其毒副作用往往导致化疗方案难以顺利实施。因此，寻找对化疗药物具有减毒或增效作用的辅助用药至关重要。氧化苦参碱是从豆科植物苦参中提取分离的一种生物碱，药理作用广泛[1]。目前，氧化苦参碱的抗肿瘤活性受到了广泛关注并进行了大量的机制研究[2，3]。但氧化苦参碱用于卵巢癌的研究报道较少，本课题将对苦参碱辅助临床化疗治疗卵巢癌进行实验研究，并对其作用机制进行初步探讨。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 2 月龄雌性Fisher344 大鼠60 只，SPF 级，体重130 ～160 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号SCXK(京)2012 -0001。

    1.2 试剂 氧化苦参碱胶囊，正大天晴制药公司;顺铂，齐鲁制药有限公司生产;NuTu-19 细胞株，上海丰寿实业有限公司。卵巢癌SKOV3 细胞，购于吉妮欧生物科技公司。氧化苦参碱注射液购于正大天晴制药公司。四甲基偶氮唑蓝(MTT)为Sigma 公司产品。Annexinv-FITC/PI 凋亡检测试剂盒，购于上海碧云天生物技术研究所。Bcl-2、Bax 一抗购于Abcam 美国公司。

    1.3 实验方法

    1.3.1 动物分组与给药[4]:NuTu-19 细胞株用含10%胎牛血清的PRIM-1640 培养基培养，胰酶消化后，用培养基洗涤，计数后用0.9%氯化钠溶液制备成2 ×107/ml 细胞悬液。按0.2 ml/只接种于Fisher344 大鼠右侧腋部皮下(留出10 只作为正常对照组)。7 d 后，将荷瘤大鼠随机分为5 组:模型组(灌胃蒸馏水，腹腔注射0.9%氯化钠溶液)、顺铂组(灌胃蒸馏水，腹腔注射顺铂3 mg/kg，隔日注射1 次)、顺铂+氧化苦参碱低剂量组(灌胃氧化苦参碱40 mg/kg，隔日腹腔注射1 次顺铂3 mg/kg)、顺铂+氧化苦参碱中剂量组(灌胃氧化苦参碱80 mg/kg，隔日腹腔注射1 次顺铂3 mg/kg)、顺铂+氧化苦参碱高剂量组(灌胃氧化苦参碱160 mg/kg，隔日腹腔注射1 次顺铂3 mg/kg)每组10 只。疗程12 d。

    1.3.2 检测指标:给药结束后，10%水合氯醛麻醉，摘取肿瘤组织，称重，计算抑制率，抑制率=(模型组平均瘤重- 治疗组平均瘤重)/模型组平均瘤重×100%。称取100 mg 肿瘤组织 ......