胡波 范红伟 王燕午 马广骏

    050081 石家庄市，中国人民解放军白求恩医务士官学校内科教研室(胡波),门诊部(王燕午);河北省石家庄市第四医院(范红伟);中国人民解放军第260医院医教处(马广骏)

    ·论著·

    丹参单体IH764-3对马兜铃酸致人肾小管上皮细胞损害的保护机制研究

    胡波范红伟王燕午马广骏

    050081石家庄市，中国人民解放军白求恩医务士官学校内科教研室(胡波),门诊部(王燕午);河北省石家庄市第四医院(范红伟);中国人民解放军第260医院医教处(马广骏)

    【摘要】目的探讨丹参单体IH764-3在马兜铃酸(aristolochic acid，AA)导致人肾小管上皮细胞系(HK-C)损害中的保护作用及机制。方法以含体积分数0.10胎牛血清的DMEM培养液培养HK-C细胞72 h。实验分为3大组(8小组)，AA组在培养液中加入浓度为20 mg/L的AA；观察组在培养液中加入浓度为20 mg/L的AA和不同浓度丹参单体IH764-3；对照组培养液中不加AA。培养24、48、72 h后，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各细胞培养液中转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、金属蛋白酶2(MMP-2)；采用MTT法观察HK-C细胞活性，实时荧光定量PCR技术检测凋亡蛋白Caspase-3mRNA的表达情况。结果AA刺激后，诱导TGF-β1、TIMP-1、PAI-1表达增加，MMP-2表达减少(P

    2结果

    2.1细胞的生长状况AA组培养48 h后，在倒置显微镜下见脱落细胞数量明显增加，大量细胞悬浮于培养液中，贴壁细胞结构不完整；观察组培养72 h后，仅部分细胞悬浮于培养液中，尤以丹参单体IH764-3(80 mg/L)组明显。见图1。

    2.2丹参单体IH764-3对TGF-β1表达的影响经过AA刺激的HK-C细胞24、48、72 h后，AA组TGF-β1水平显著高于对照组(P

    AA组对照组观察组

    图13组细胞生长状况(×400)

    表1不同浓度丹参单体IH764-3对TGF-β1的影响 ......