白瑜 杜丽敏 赵平

    ·论著·

    黄体酮对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞微管相关蛋白-1B的影响

    白瑜 杜丽敏 赵平

    目的 观察并探讨黄体酮对视神经损伤早期视网膜神经节细胞微管相关蛋白-1B的影响，以期为黄体酮在视神经保护方面的作用提供实验依据。方法 60只大鼠随机分为3组,每组20只。正常对照组不做任何处理，损伤1组制作右眼视神经夹伤模型，给予0.9%氯化钠溶液腹腔注射，损伤2组制作右眼视神经夹伤模型，给予黄体酮腹腔注射。分别于损伤后1、3、7、14、28 d将3组大鼠右眼球摘除, 取视网膜组织, HE染色光学显微镜观察视网膜形态学变化，并计数视网膜神经节细胞存活数量,免疫组织化学染色观察视网膜组织中 MAP-1B在视网膜神经节细胞的表达情况。结果 视神经损伤后损伤1组视网膜神经纤维层明显水肿，视网膜神经节细胞数目迅速减少，经黄体酮治疗的损伤2组视网膜形态改变轻微，视网膜神经纤维层轻度水肿，视网膜神经节细胞数目减少缓慢。损伤2组各时间段视网膜MAP-1B平均光密度值较损伤1组高，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组 清洁级健康成年雄性SD大鼠60只，购自河北医科大学实验动物中心，合格证号：SCXK(冀2012-3-05)。体重(200±20)g，行外眼及眼底检查无病变者纳入实验。选择右眼为实验眼，随机分为正常对照组(不做任何处理)、损伤1组(右眼行视神经不全损伤处理，伤后每日腹腔注射0.9%氯化钠溶液10.0 mg/kg)、损伤2组(右眼行视神经不全损伤处理，伤后每日腹腔注射PROG 10.0 mg/kg)，每组20只。

    1.2 实验试剂 黄体酮注射液(上海通用药业股份有限公司)，SP免疫组化试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)DAB检测试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)MAP-1B抗鼠单克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 视神经损伤模型制作[3]:损伤1组及损伤2组均于术前3 d用抗生素眼水、眼膏点眼。正常对照组大鼠不做任何处理。2损伤组大鼠用5%水合氯醛7 ml/kg 腹腔注射麻醉成功后，将实验组大鼠取俯卧位固定于手术台上，消毒铺巾，取右眼为实验眼，在手术显微镜下沿角巩膜缘弧形向上沿鼻侧剪开球结膜，钝性分离眼眶组织直达视神经，在距球后2 mm处，用压力恒定的反向颞夹持视神经20 s造成视神经不全损伤，用10-0尼龙线缝合球结膜2针，结膜囊内涂盐酸洛美沙星眼膏。术眼瞳孔散大固定、直接光反射消失为成功模型，否则剔除 ......