宋玉霞 赵涛 张玮璨 郭清 王宏卫 孟桐羽

    050011 河北省石家庄市第一医院妇产科(宋玉霞、赵涛、郭清、王宏卫、孟桐羽)；河北医科大学(张玮璨)

    ·论著·

    卵巢癌SKOV3细胞系培养上清液处理巨噬细胞不同时间后对巨噬细胞分化的影响

    宋玉霞赵涛张玮璨郭清王宏卫孟桐羽

    050011河北省石家庄市第一医院妇产科(宋玉霞、赵涛、郭清、王宏卫、孟桐羽)；河北医科大学(张玮璨)

    【摘要】目的探讨卵巢癌SKOV3细胞系培养上清液处理巨噬细胞不同时间后，巨噬细胞分化亚型的改变。方法Ficoll 密度梯度法分离健康成人外周血单个核细胞，GM-CSF诱导为巨噬细胞(M0)后，用对数生长期的SKOV3细胞培养上清液处理为实验组，用1640培养基处理为对照组，分别于培养第7天和第14天光学显微镜下观察巨噬细胞形态变化；流式细胞术检测实验组和对照组在不同时间后巨噬细胞表面细胞因子(CD64、CD163)表达情况。结果培养第7天时，实验组巨噬细胞形态改变明显，细胞突起增加，细胞变细长，对照组细胞形态无明显变化，实验组CD64-M1型巨噬细胞所占比例高于对照组，CD163-M2型巨噬细胞所占比例低于对照组(P 70%的病例确诊时已是FIGO Ⅲ/Ⅳ 期的晚期癌症患者，表现为腹腔内广泛播散和转移。慢性炎症能够促进肿瘤的发生发展，并诱发不同类型的癌症。炎症微环境还有利于肿瘤细胞穿过基底膜，进而发生侵袭和转移[1],因此近年来的一些研究集中于肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associateed macrophages，TAMs)。肿瘤相关巨噬细胞作为侵入实体肿瘤中单核细胞群的主要细胞，大量存在于肿瘤血管周围和低氧区，是炎症进展成为癌症的主要桥梁[2]。卵巢癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润数量和卵巢癌预后不良明显相关，逐渐开展了从免疫学角度研究卵巢癌转移和进展的机制。之前一些研究发现，不同分期的卵巢癌患者腹腔巨噬细胞不同亚型所占比例不同，早期卵巢癌患者腹腔冲洗液中以表达M1型巨噬细胞为主，而晚期患者腹水中主要以M2型巨噬细胞占优势[3]。根据“免疫编辑”学说，免疫系统对肿瘤的作用随肿瘤的进展不断变化，提示我们不同亚型的巨噬细胞在卵巢癌进展中发挥不同的作用，对卵巢癌恶性表型有重要意义。鉴于巨噬细胞在卵巢癌中的重要作用，本项目拟利用细胞培养及流式细胞学等实验技术，通过构建卵巢癌细胞系SKOV3培养上清与巨噬细胞共培养模型，明确经SKOV3培养上清培养后的巨噬细胞亚型的变化及巨噬细胞亚型改变与SKOV3培养上清培养时间的关系，探讨卵巢癌细胞系SKOV3上清对巨噬细胞亚型的影响 ......