潘峰 丁寅 李宝勇

    ·论著·

    外源性雌激素对人牙周膜干细胞骨分化能力影响的实验研究

    潘峰丁寅李宝勇

    目的检测外源性雌激素对人牙周膜干细胞(PDLSCs)骨分化能力的影响。方法将体外培养的PDLSCs加入无酚红成骨诱导培养液和不同浓度的17β-E2[分为E10-7、E10-8、E10-9组和对照组(成骨诱导培养液+无水乙醇(0.01%)]-雌二醇[分为E10-7、E10-8、E10-9组、ICI组(成骨诱导培养液+ICI182780)、E10-7+ICI组(成骨诱导培养液+1×10-717β-E2+1×10-7ICI182780)]，观察各组细胞形态、测定其增值水平、碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原合成能力。结果添加外源性雌激素后，细胞增殖加快，生长密集，呈螺旋状排列。PDLSCs的增殖发生变化，与对照组相比，第3、5天雌激素干扰组细胞增殖受到抑制(P0.05); PDLSCsⅠ型胶原合成表达与对照组相比有增加趋势，且与药物浓度有剂量依赖关系。结论雌激素对PDLSCs成骨分化过程有促进作用，该作用与雌激素浓度密切相关。

    干细胞；人牙周膜干细胞；雌激素；成骨分化

    近年来，作为研究热点的干细胞，为牙周疾病的治疗提供了新思路。现已有研究证实人牙周膜内存在干细胞[1]，具备多向分化及增殖潜能，在牙周疾病及骨质疏松的患者牙周组织改建中承担重要角色。而牙周疾病及骨质疏松的发生与体内雌激素水平低下密切相关[2-5]，牙周膜干细胞(periodotal ligament stem cells，PDLSCs)是牙周改建和修复中主要的细胞类型，发挥重要作用，其在体内增殖及成骨分化时会受到雌激素怎样的影响，日益受到临床关注。本研究通过观察PDLSCs成骨分化过程中，雌激素对其增殖和碱性磷酸酶活性的影响，从而明确雌激素对牙周改建及再生产生影响的生理作用机制，为牙周病的临床治疗提供一定的实验依据。

    1 材料与方法

    1.1仪器与材料胶原酶，胰蛋白酶，Dispase酶，1%PBS，基质蛋白-l单克隆抗体(STRO-1，R&D，美国)，α-MEM培养基(Gibco，美国)，地塞米松、维生素C(Sigma，美国)，β-甘油磷酸钠、胎牛血清(FBS，杭州四季青生物工程有限公司，中国),羊抗小鼠磁珠试剂盒(Dynalbiotech，美国)， 70 μm细胞筛网(Falcon，美国)，YJ-875型超静工作台(苏州净化设备厂，中国)，CO2孵箱(Heraeus，德国)，倒置相差显微镜及照相系统(Olympus ......