李会英 李国兴 崔佳 刘哲敏 杜宁 刘学聪 乔玉巧

    ·论著·

    黄芩苷对大鼠牙周炎牙龈组织中TNF-αmRNA和IL-6mRNA表达的影响

    李会英李国兴崔佳刘哲敏杜宁刘学聪乔玉巧

    目的观察黄芩苷对牙周炎大鼠牙龈组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达的影响，探讨黄芩苷治疗牙周炎的治疗机制。方法选用50只8周龄SD大鼠，随机分成5组,每组10只，A组为正常对照组， B组为牙周炎组，C1、C2、C3组为黄芩苷治疗组，B，C1，C2，C3组建立牙周炎模型，治疗1周后处死，采用RT-PCR方法检测TNF-αmRNA、IL-6mRNA在5组大鼠牙龈组织中的表达水平。结果牙周炎组大鼠牙龈组织中TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达强度显著高于正常对照组(P1 材料与方法

    1.1实验材料

    1.1.1实验动物：SD大鼠50只，清洁级，8周龄，雄性，体重(220±20)g，由河北医科大学实验动物中心提供(动物合格证号：1410084)。大鼠适应环境1周后进行实验。喂饲实验动物中心的标准动物饲料，自由摄取水和食物。

    1.1.2主要药品与仪器：大肠杆菌ATCC O55:B5的脂多糖 (美国，sigma公司)，黄芩苷(中国药物生物制品检定所)；总RNA提取试剂TRIzol Reagent(GIBCOBRL公司,美国)；逆转录试剂与PCR试剂SYBR?PrimeScript?RT-PCR Kit (TaKaRa公司，日本)；TNF-αand IL-6及GADPH引物(上海生工生物工程有限公司)；Kodak_1DDC_120电泳凝胶成像自动分析系统(Kodak公司,美国)；7500荧光定量PCR仪(AB公司；美国)。

    1.2实验方法

    1.2.1溶液的配制：取2 mg黄芩苷溶于2 ml 0.9%氯化钠溶液中，碳酸氢钠调pH值至7.4，至黄芩苷完全溶解，成为1 mg/ml的储存液，4℃保存备用，试验时用0.9%氯化钠溶液稀释至所需浓度；取10 mg脂多糖(LPS)，用0.9%氯化钠溶液稀释至1 mg/ml的溶液。LPS的终末浓度为1 mg/ml，黄芩苷终末浓度为0.01、0.1、1.0 μg/ml。

    1.2.2动物分组及牙周炎模型的建立：取SD大鼠50只,随机分5组：对照组(A组)、牙周炎组 (B组)、黄芩苷治疗组(C1、C2、C3组)，每组10只。除A组外,其余4组大鼠用10%水合氯醛(0.3 g/kg)腹腔注射麻醉成功后，选大鼠右上颌第1、2磨牙之间颊腭侧龈沟底注射LPS(1 mg/ml)各0.2 ml ......