缑丽军

    EMP1、EGF和NRG3在鼻息肉中的表达水平及糖皮质激素的影响

    缑丽军

    目的探讨上皮膜蛋白1(EMP1)、表皮生长因子(EGF)、神经调节蛋白3(NRG3)在鼻息肉中的表达水平及糖皮质激素对其表达的影响。方法鼻息肉组织标本取自于40例鼻息肉病例。选择30例因鼻中隔偏曲接受鼻内镜手术的病例的下鼻甲黏膜组织作为对照组。40例鼻息肉病例中，伴重度上皮增生14例，伴轻中度上皮增生26例；伴鳞状上皮化生12例，不伴鳞状上皮化生28例。采用实时荧光定量技术(qRT-PCR)、免疫组化方法检测EMP1、EGF和NRG3的表达水平。结果鼻息肉组组织中EMP1、EGF、NRG3 mRNA的表达水平均低于对照组，差异有统计学意义(P1 资料与方法

    1.1一般资料鼻息肉组织标本取自2014年11月至2015年8月我院耳鼻喉科收治的40例患有双侧鼻息肉并接受鼻内镜治疗的病例，鼻息肉经病理科病理确诊，符合鼻息肉的诊断标准[5]。鼻息肉组患者，男26例，女14例；年龄23～75岁，平均年龄(47.91±5.56)岁；40例鼻息肉病例中，经病理科病理检测，伴重度上皮增生14例，伴轻中度上皮增生26例；伴鳞状上皮化生12例，不伴鳞状上皮化生28例。选择30例同期在我院因鼻中隔偏曲接受鼻内镜手术的病例的下鼻甲黏膜组织作为对照组，男20例，女10例；年龄23～75岁，平均年龄(46.82±5.32)岁。2组性别比、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究均经入组患者知情同意，并获我院伦理委员会审批通过。

    1.2标本采集及处理鼻息肉患者均在鼻内镜手术前6周接受过布地奈德鼻喷剂鼻治疗(128 μg/次，2次/d，生产厂家：瑞典Astra Zeneca AB)，分别于糖皮质激素治疗前、治疗后取鼻息肉组织。对照组患者组织标本取自于手术中。将新鲜组织样本分为两部分：一部分装入无菌EP管中，分存于液氮，以备后续荧光定量PCR(qRT-PCR)检测使用；一部分用甲醛固定石蜡包埋后(厚约4 μm的切片)用于免疫组化。

    1.3实验方法

    1.3.1荧光定量PCR：采用美国BD公司生产的荧光定量PCR(qRT-PCR)仪行qRT-PCR，检测鼻息肉组织和对照组组织中EMP1、EGF、NRG3 mRNA的表达水平。PCR反应步骤如下：94℃预变性3 min;94℃变性20 s，60℃退火30 s，72℃延伸40 s;35个循环，72℃延伸10 min。

    1.3.2免疫组化：采用SP法对石蜡切片行免疫组化检测 ......