易燕 刘芳 柴艳婷 纪宏先 李珍

    ·调查研究·

    十堰市苯丙酮尿症儿童苯丙氨酸羟化酶基因突变检测研究

    易燕 刘芳 柴艳婷 纪宏先 李珍

    目的 分析十堰市苯丙酮尿症(PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因的突变特点，以指导产前诊断。方法 纳入2012年1月至2015年12月十堰市确诊的PKU患儿15例为研究对象，应用PCR产物直接测序法，检测患儿PAH基因全部外显子及其启动子区域序列。结果 30个PAH等位基因中，突变基因出现19个，占63.3%，类型共10种。突变类型主要为R243Q、R241C、Y365X、R111X，其余均为散在发生突变，对比国内外文献及PAH相关国际数据库，未见新的基因突变类型。结论 十堰市PAH基因突变具有多样性和复杂性，R243Q、R241C、Y365X、R111X为其主要突变位点。

    苯丙酮尿症；儿科；苯丙氨酸羟化酶；基因突变

    苯丙酮尿症(PKU)为常染色体隐性遗传病，由苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变，导致PAH活性降低或丧失，使苯丙氨酸在体内大量积蓄所致[1]，该疾病可影响神经系统发育，导致严重的智力低下及神经行为异常[2,3]。早期诊断、及时治疗是降低疾病影响的重要措施[4,5]，因此明确患儿PKU基因的突变特点，提升基因诊断效果有重要意义。该疾病的发病有显著的种族及地域差异[6]，本研究重点探讨了十堰市患儿PAH基因突变特点，旨在提升该疾病的早期诊断、遗传咨询和孕前干预效果，报告如下。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 纳入对象共15例，均为2012年1月至2015年12月十堰市新生儿疾病筛查中心筛查确诊或门诊就诊后确诊的经典型PKU患儿，患儿监护人均对本研究知情同意。患儿年龄20 d～5岁,平均(2.2±0.7)岁，户口在我市且至研究结束时未变动，初诊时血清苯丙氨酸浓度274～2 710 μmol/L、平均(1 857.6±582.4)μmol/L，患儿均经尿喋吟分析排除四氢生物喋吟缺乏症。

    1.2 方法

    1.2.1 试剂与仪器:全血基因组DNA提取试剂盒、2×RCR Master Mix、DNA纯化试剂盒，均购自北京天根生物技术有限公司；Chelex-100，购自Biorad；引物合成，由上海生工生物技术有限公司提供；PCR扩增仪、基因测序仪 ......