晋国权 李淼

    ·论著·

    Ⅱ、Ⅲ期结肠癌患者TS、TP和DPD表达水平与5-Fu为基础的化疗疗效及预后的关系研究

    晋国权 李淼

    目的 分析探讨Ⅱ、Ⅲ期结肠癌患者TS、TP、DPD表达水平与5-Fu为基础的化疗疗效及预后的相关性。方法 入选120例术后接受氟尿嘧啶为基础化疗的Ⅱ、Ⅲ期结肠癌患者，采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析TS、TP、DPD表达水平与化疗疗效及患者生存预后的相关性。结果 肿瘤组织的TP mRNA表达水平明显高于正常组织，DPD mRNA表达水平明显低于正常组织(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2007年1月至2009年1月在我院肿瘤科住院治疗的结肠癌患者120例为研究对象。另外，收集同期在我院普外科由于结肠癌之外的疾病而手术切除的正常结肠组织15例为对照。见表1。

    表1 120例结肠癌的基本特征及主要临床病理参数

    1.2 入选标准 (1)组织病理学检查结果确诊为Ⅱ、Ⅲ期结肠癌；(2)入选患者接受氟尿嘧啶类药物(5-Fu)为基础的辅助化疗方案；(3)临床病历资料记录详实，且理论上能够完成疗效评估及5年随访；(4)知情同意以后，患者及家属同意参加本研究，并签署知情同意书。本研究获得本院医学伦理委员会的审核批准。

    1.3 信息采集 采用本研究自制的统一调查表，收集患者的基本信息，包含人口学基本特征及详细的临床病理参数。

    1.4 实验室检测

    1.4.1 肿瘤组织的收集:入选的研究对象经手术切除肿瘤后，立即收集新鲜的肿瘤组织标本，经0.9%氯化钠溶液冲洗2次浸泡于0.9%氯化钠溶液中；然后用石蜡包埋，经苏木精、伊红染色、中性红染色，最后由病理医生采用显微切割机取10 μm肿瘤组织并确保选中的组织只包含肿瘤组织后，行实时荧光定量PCR实验定量检测TS、TP、DPD mRNA表达。

    1.4.2 RNA的提取及RT-PCR实验:切除下的肿瘤组织Trizol法提取RNA，获得每份样本的cDNA后，目标cDNA序列通过实时荧光定量PCR实验进行扩增。RT-PCR的反应体系：600 nmol/L 引物，5 mmol/L MgCl2，200 nmol/L aATP、dCTP、dGTP，400 nmol/L dUTP，总体积25 μl ......