孙云 胡晓杰 马国娟 尹香云 冯博超 彭彦辉

    ·论著·

    TGF-β1、LMO1在胃癌组织中的表达及意义

    孙云 胡晓杰 马国娟 尹香云 冯博超 彭彦辉

    目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)、LMO1在胃癌组织的表达及二者的相关性，探讨TGF-β1、LMO1在胃癌发生发展中的作用。方法 选取60例胃癌和50例正常胃组织，采用Real time-PCR和Western Blot检测TGF-β1、LMO1 mRNA和蛋白表达水平。采用免疫组织化学SP法检测TGF-β1、LMO1蛋白表达，分析TGF-β1、LMO1表达与胃癌临床病理特征的关系。结果 胃癌组织TGF-β1、LMO1 基因的mRNA和蛋白表达水平均比正常胃黏膜组织明显增强(P0.05)，而与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 入组患者为2013年4月至2014年4月于我院确诊为胃癌并行手术切除者，患者共60例。所有患者均为初诊患者，术前未接受过放化疗、靶向治疗或生物治疗。所有患者均有完整的病历资料。患者中男38例，女22例;年龄32～62岁，中位年龄48.4岁;胃癌发生部位：贲门15例，胃体20例，胃窦25例；WHO分型：低分化腺癌34例，中分化腺癌18例，高分化腺癌8例；TNM临床分期：Ⅰ+Ⅱ期20例，Ⅲ+Ⅳ期40例；浸润深度超过浆膜层41例，未超过浆膜层19例；局部淋巴结转移阳性者48例，淋巴结转移阴性者12例。选取同期于我院行胃镜活检病理证实为正常胃黏膜的标本50例作为对照组,其中男28例，女22例；年龄21～63岁，中位年龄44.8岁。

    1.2 主要试剂 兔抗人TGF-β1、LMO1多克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品。Trizol、实时荧光定量试剂盒购自美国Promega公司。免疫组化试剂盒购自上海生工生物公司。

    1.3 实验方法

    1.3.1 Real time-PCR检测TGF-β1、LMO1基因mRNA的表达:TGF-β1、LMO1基因的引物均由上海生工生物公司设计并合成。GAPDH为内参照基因。将胃癌及正常胃黏膜组织标本各100 mg于液氮中研磨，一步法Trizol提取组织总RNA，紫外分光光度计测定RNA的纯度和浓度。采用ABI 7300型荧光定量PCR仪进行Real time-PCR实验。实验结束后采用仪器自带的SDS v1. 3软件分析得出各样本的Ct值。将对照组样品Ct值设定为标准1，TGF-β1、LMO1基因表达水平的相对定量值为RQ=2-ΔΔCt ......