姚雅俪 邓曼丹 李毅

    ·论著·

    NF-κB和HBD-2的表达情况与宫腔粘连的相关性分析

    姚雅俪 邓曼丹 李毅

    目的 探讨核因子κB(NF-κB)和β-防御素2(HBD-2)表达与宫腔粘连的关系。方法 选取治疗的51例宫腔粘连患者的子宫内膜作为观察组，同时选取42例正常内膜组织作为对照组，采用免疫组织化学检测2组NF-κB和HBD-2表达水平，RT-PCR检测NF-κB mRNA和HBD-2 mRNA表达。结果 NF-κB在观察组中的高表达比例为80.39%明显高于对照组的11.90%，差异有统计学意义(P0.05)；观察组NF-κBmRNA与HBD-2mRNA相对表达量分别为(9.56±2.27)和(9.60±2.31)，明显高于对照组，差异有统计学意义(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2015年1月至2016年1月在我院治疗的51例宫腔粘连患者的子宫内膜作为观察组，年龄24～35岁，平均年龄(30.32±2.31)岁；同时选取因继发性不孕行宫腔镜检查的42例患者的正常内膜组织作为对照组；纳入标准：(1)患者经宫腔镜检查证实；(2)入选前6个月未使用过任何激素制剂；(3)无子宫内膜良恶性及癌前病变、妇科内分泌疾病、乳腺肿瘤及乳腺增生；(4)患者知情同意并签署同意书。排除标准：(1)有生殖道急性炎症；(2)子宫内膜不典型增生，有宫内节育器及过敏史；(3)有全身结缔组织病变，心、肝、肾等重要脏器疾病。

    1.2 检测方法 (1)免疫组化检测NF-κB和HBD-2的表达采用石蜡切片脱蜡至水，切片厚度3 mm，3%H2O2室温孵育5 min，采用去离子水水冲洗3次，每次3 min，采用浓度为10%牛奶蛋白(1 g蛋白加入100 ml纯水)封闭，室温孵育5 min，加入NF-κB和HBD-2抗体(鼠来源，南京碧云天生物科技有限公司),37 ℃孵育2 h，PBS缓冲液冲洗3次，每次5 min，滴加HRP标记的二抗(兔来源，购自罗氏检测公司)，37℃孵育30 min，PBS冲洗3次，每次5 min，加入 NBT/BCIP色剂显色5 min，复染，脱水，透明，封片，镜下观察。OLIPICS电子显微镜购自上海精密仪器有限公司，配套试剂购自南京泰康生物科技有限公司。(2)采用RT-PCR技术检测 mRNA的表达采集患者静脉血2 ml，按照10 000 r/min的离心速度进行离心分离血清，每1毫升的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2 ml的氯仿，加0.2 ml氯仿，剧烈摇动30 s，室温3 min ......