吴天思 崔阳阳 孙伟伟 赵瑞华 徐彩

    ·论著·

    活血消异方对子宫内膜异位症模型小鼠子宫内膜容受性的影响研究

    吴天思 崔阳阳 孙伟伟 赵瑞华 徐彩

    目的 探讨子宫内膜异位症对子宫内膜容受性的影响机制以及活血消异方对子宫内膜异位症模型小鼠子宫内膜容受性的作用。方法 通过“皮下+腹腔”同系异体子宫内膜注射的方法建立子宫内膜异位症妊娠功能低下小鼠模型，假手术予等量0.9%氯化钠溶液注射。建模成功后，随机分为中药组和模型组，中药组予活血消异方干预治疗，模型组和假手术组予等量0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)灌胃。连续治疗3个周期后，3组分别与不育雄鼠合笼，次日清晨8∶00观察阴栓，见栓者定为假孕第1天，于假孕第4天晚上10∶30取材，运用Western blot法检测小鼠子宫内膜整合素αvβ3和LIF的蛋白表达。结果 模型组小鼠种植窗口期子宫内膜整合素αvβ3和LIF的蛋白表达量较假手术组显著降低，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级健康昆明雌性小鼠100只，7周龄，体重(25±3)g。昆明雄性小鼠30只，7周龄。由中国医学科学院医学实验动物研究所提供，合格证号：SCXK(京)2014-0004。

    1.2 药物及试剂 活血消异方由柴胡、制香附、丹参、赤芍药、莪术、皂刺等药物组成，由中国中医科学院广安门医院煎药室提供。以上生药加10倍量水，反复煎煮3次，每次1 h，合并煎液、过滤，放置24 h，浓缩。药物浓度为1.8 g生药/ml，药液4℃冰箱保存。Mouse整合素αvβ3抗体(NB600-1342，Novus Biologicals)，Rabbit LIF抗体(ab113262，Abcam)，Beta actin(TA-09，北京中杉金桥生物技术有限公司)。其他实验试剂及药物均由中国中医科学院广安门医院制剂室提供。

    1.3 实验仪器 美国伯乐高压电泳仪，美国Thermo迷你振荡器，中国湘仪高速冷冻离心机，美国Fluka匀浆器。

    1.4 实验方法

    1.4.1 模型的建立及分组:造模前连续1周进行小鼠阴道脱落细胞涂片检查[1]，动情周期正常的小鼠作为受体小鼠。余作为供体小鼠，连续3 d皮下注射苯甲酸雌二醇0.02 mg(1 mg/ml)。造模时将供体小鼠常规消毒后脱颈处死，沿腹中线打开腹腔，将双侧子宫取出，置于盛有0.9%氯化钠溶液的培养皿中，然后采用“滚针法”将内膜挤压分离出，剪成1 mm×1 mm的碎片，待接种。用0.9%水合氯醛将供体小鼠腹腔注射麻醉 ......