王克猛 魏世平 牛长磊 王海燕 牛军强 孟庆聚

    ·论著·

    CyclinD1及CDK4在软骨肉瘤诊断中的应用

    王克猛 魏世平 牛长磊 王海燕 牛军强 孟庆聚

    目的 观察CyclinD1及CDK4蛋白在软骨肉瘤中的阳性表达状态，探讨CyclinD1及CDK4蛋白在软骨肉瘤发生发展中的机制。方法 以SP法检测肿瘤组织中CyclinD1及CDK4蛋白表达的情况。结果 软骨肉瘤组织中CyclinD1、CDK4同时高表达，两者呈正相关关系(P1 材料与方法

    1.1 材料 随机选取河北省医科大学第三医院病理科、邢台医专第一附属医院病理科2008年3月至2011年10月手术切除的存档病例，经病理诊断，明确为软骨肉瘤。复习原切片及免疫组织化学资料，根据2002年WHO软组织与骨肿瘤病理学和遗传学分类标准[3]，经两位资深骨病理医师阅片确定，筛选出普通型软骨肉瘤46例，其中组织学分级Ⅰ级16例、Ⅱ级20例、Ⅲ级10例；患者年龄5～83岁，中位年龄43.7岁；男25例，女21例；发生部位：股骨27例，髋骨(髂骨、耻骨、坐骨)11例，其他部位8例。患者均为散发病例，且为初次手术，术前均未经放疗或化疗。作为对照另外选取18例骨软骨瘤及10例正常软骨组织。

    1.2 方法 所有标本均连续切4 μm厚切片，贴于防脱玻片，用Sp法进行免疫组织化学法染色。鼠抗人CyclinD1单克隆抗体、鼠抗人CDK4单克隆抗体试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术公司，免疫组织化学染色按试剂盒操作说明进行，染色过程中设阳性和阴性对照，阳性对照用已知阳性切片，阴性对照采用PBS代替一抗。

    1.3 免疫组化染色结果判断标准 CyclinD1、CDK4蛋白阳性表达为棕褐色颗粒，主要表达于细胞核内，分布呈现局灶性或弥漫性。显微镜下400×高倍镜下随机观察10个视野，每个视野计数100个肿瘤细胞中的阳性细胞数，观察中向同一方向移动切片，保证观察切片不重复，不重叠。标本无阳性反应细胞或阳性反应细胞率小于10%为阴性；标本阳性细胞呈淡棕黄色或阳性反应细胞率介于10%～50%为阳性(+)；标本阳性细胞呈深棕黄色，且阳性反应细胞率大于50%为强阳性(++)[4]。

    1.4 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P2 结果

    2.1CyclinD1蛋白在正常软骨组织、骨软骨瘤及软骨肉瘤中的表达情况CyclinD1蛋白阳性表现为细胞核内有棕黄色颗粒 ......