傅鸣郁 张海宁 田静 牛玲 何秀华 王庆文 王燕 李春利 王镇洲 安新江

    ·论著·

    川崎病动物模型弓动脉中VEGF/PTEN/PI3K信号通路的表达研究

    傅鸣郁 张海宁 田静 牛玲 何秀华 王庆文 王燕 李春利 王镇洲 安新江

    目的 观察川崎病幼兔模型VEGF/PTEN/PI3K信号通路变化，探讨其可能的机制。方法 随机将40只幼兔分为正常组(10只)和模型组(30只)，模型组按照2.5 ml/kg的剂量，分别于第1天和第14天耳缘静脉注射10%牛血清白蛋白，正常组给予等量0.9%氯化钠溶液注射。分别于造模完成后第1、7、30天收集家兔血清，弓动脉，检测血清白细胞、CK、VEGF水平，HE染色观察各组幼兔弓动脉组织形态学变化，免疫组化染色观察弓动脉PTEN、PI3K表达情况。结果 与正常组比较，模型组幼兔，造模后第1天，血清VGEF水平显著升高，表明体内发生炎症反应，而到第7天，VEGF水平呈下降趋势(P1 材料与方法

    1.1 动物 日本大耳幼兔(简称幼兔)40只，3～4周龄，体重(800±50)g，雌雄不拘，购自沈阳药科大学，许可证号：SCXK(辽)2014-0002。

    1.2 试剂与药物 牛血清白蛋白(批号A8020，北京Solarbio公司产品)，鼠抗兔VEGF ELISA试剂盒(美国Cloud-Clone Corp)，鼠抗兔PTEN多克隆抗体(美国Cell Signaling公司)，鼠抗兔PI3K单克隆抗体(美国Cell Signaling公司)。

    1.3 主要仪器 石蜡切片机(RM-2235，德国Leisa)，生物组织石蜡包埋机(YB-6LF)，Olympus光学显微镜(BX-41，日本Olympus公司)，Image ProPlus 6.0软件(美国Media Cybernetics公司)。

    1.4 方法

    1.4.1 分组、造模及取材:40只随机分为正常组(10只)和模型组(30只)。模型组按照2.5 ml/kg的剂量，分别于第1天和第14天耳缘静脉注射10%牛血清白蛋白。正常组给予等量0.9%氯化钠溶液注射。于造模完成后第1、7、30天分别采集耳缘静脉血2 ml于灭菌后试管，4℃放置30 min，3 000 r/min离心10 min ......