邵田

    ·论著·

    miR-15a在子宫内膜癌组织中的表达变化及临床意义

    邵田

    目的 探讨miR-15a在子宫内膜癌组织中表达变化及临床意义，分析miR-15a在子宫内膜癌发生发展过程中的可能机制。方法 通过荧光定量PCR法测定68例子宫内膜癌组织和68例癌旁组织的miR-15a表达情况；分别将无关序列模拟物(非转染组)、miR-15a模拟物(转染组)转染入RL95-2人子宫内膜癌细胞，设立阴性对照组，比较3组的miR-15a和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达情况；并通过Transwell肿瘤细胞侵袭试验和Transwell肿瘤细胞迁移试验检测RL95-2细胞的侵袭力和迁移能力。结果 子宫内膜癌组织miR-15a相对表达量明显低于癌旁组织(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2014年5月至2016年5月我院收治的子宫内膜癌患者的资料，病历资料完整且取得子宫内膜癌组织和癌旁组织石蜡切片的患者纳入本研究，共入选68例患者。入选标准：(1)均行手术治疗；(2)行手术治疗前均未进行放化疗或者其他辅助治疗；(3)病历资料保存完整者。排除标准：(1)伴有远处转移者；(2)复发患者。68例患者中，年龄48～73岁，平均年龄(55.9±7.2)岁；国际妇产科联盟(FIGO)制定的分期[6]：Ⅰ期18例，Ⅱ期26例，Ⅲ期14例，Ⅴ期10例；分化程度：G1者31例，G2者23例，G3者14例；病理类型：子宫内膜样内膜癌61例，浆乳癌或透明细胞癌7例；肌层浸润深度：≤1/2者51例，>1/2者17例；有淋巴结转移15例，无淋巴结转移53例。

    1.2 方法

    1.2.1 仪器与试剂:RL95-2人子宫内膜癌细胞(上海康朗生物科技有限公司生产)，实时荧光定量PCR仪及其试剂盒(美国BioRad公司生产)，LipofectamineTM2000细胞转染试剂盒、总RNA提取试剂盒TRIzol(美国Roche公司生产)，0.25%胰酶、PBS、DMEM培养基、胎牛血清(美国Gibco公司生产)，miR-15a片段的设计与合成由上海研域生物工程有限公司完成，NanoDrop2000 型紫外分光光度计(美国Merinton公司生产)。

    1.2.2 子宫内膜癌组织与癌旁组织miR-15a检测:通过荧光定量PCR法测定子宫内膜癌组织和癌旁组织的miR-15a表达情况，取总RNA提取试剂盒对子宫内膜癌组织和癌旁组织的RNA进行提取，取紫外分光光度仪检测所提取RNA的浓度及纯度，A260/A280值≥1.8的样品进行测定；把RNA逆转录合成为cDNA ......