郝明 周楠 杜惠兰

    ·论著·

    逍遥丸对调节雄激素致排卵障碍模型大鼠卵巢氧化损伤和颗粒细胞凋亡的研究

    郝明 周楠 杜惠兰

    目的 观察逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠卵巢氧化损伤和颗粒细胞凋亡的影响。方法 60只9日龄SD雌性大鼠随机选取20只为正常组，余40只皮下注射丙酸睾丸酮建立雄激素致排卵障碍模型大鼠模型，造模成功后，随机分为模型组和逍遥丸治疗组，每组20只，给药5周，于动情前期断头取血，比色法测定3组大鼠血清和卵巢T-AOC水平，硫代巴比妥法测定3组大鼠血清和卵巢MDA水平；免疫组化SP法检测3组大鼠卵巢组织中Caspase-3蛋白的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠血清和卵巢中T-AOC水平显著降低，MDA水平显著升高(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 选用同批出生9日龄健康雌性SD大鼠60只，体重约15 g，合格证号：812037，由河北医科大学实验动物中心提供。

    1.2 实验药物 丙酸睾丸酮注射，天津金耀氨基酸有限公司生产，合格证号：0203232。逍遥丸，广西梧州三鹤药业有限公司，将200丸(每8丸相当于生药3 g)逍遥丸溶于125 ml蒸馏水中制成混悬液，置于4℃冰箱中保存备用。

    1.3 主要试剂及仪器 总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；Caspase-3免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物技术有限公司。以上试剂盒不与其他细胞因子有交叉反应。高速冷冻离心机：DL-5 000 B，上海安亭科学仪器厂；电热恒温培养箱：HHB11360，天津三水科学仪器有限公司；OLYMPUS显微照相机：C-35AD-2，日本；721分光光度计：上海第三分析仪器厂产品。

    1.4 方法

    1.4.1 动物模型及分组:参照俞瑾等[6]方法，将9日龄同批出生SD雌性大鼠60只，随机选取40只于颈背部皮下注射丙酸睾丸酮0.05 ml/只(1.25 mg/只)，第70日龄时行阴道脱落细胞涂片，当阴道上皮细胞持续角化时提示造模成功。其余20只，于颈背部皮下一次性注射中性茶油0.05 ml作为正常组。40只造模成功的大鼠，随机分为模型组和逍遥丸治疗组，每组20只。遥丸治疗组:每日灌服逍遥丸5 ml(5.3 g/ml/100 g体重，相当于临床剂量20倍)，正常组和模型组灌服等剂量蒸馏水，每天1次，连续灌胃5周。

    1.4.2 动物一般状况:每周测量大鼠体重，观察3组大鼠一般情况，包括形体、发育、活动、神态、摄食量、毛色等并做记录 ......