杨立军 郑文武 周安传 苏晓哲 吴亚东 李珅

    ·论著·

    膀胱移行细胞癌组组织Bcl-2的表达及与临床生物学行为的关系

    杨立军 郑文武 周安传 苏晓哲 吴亚东 李珅

    目的 探讨Bcl-2在膀胱移行细胞癌及癌旁组织中的蛋白表达水平，分析其与临床病理指标的关系及意义，为膀胱移行细胞癌的诊断及临床治疗提供理论依据。方法 用流式细胞分析技术检测45例膀胱移行细胞癌及对应的45例癌旁组织及10例正常膀胱黏膜移行上皮组织中的Bcl-2蛋白的表达。结果 癌旁组织组Bcl-2阳性率高于正常膀胱组和膀胱移行细胞癌组，膀胱移行细胞癌组表达阳性率高于正常膀胱组，差异均有统计学意义(P0.05)。膀胱移行细胞癌组织Bcl-2蛋白表达阳性的凋亡率明显低于阴性表达(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 标本取自2012至2013年在石家庄市第一医院泌尿外科进行外科治疗的住院患者，其中膀胱移行细胞癌45例(膀胱移行细胞癌组)、对应的癌旁组织45例(癌旁组织组)，正常膀胱黏膜组织10例(正常膀胱组)。膀胱移行细胞癌组均经术后病理证实，其中男33例，女12例；年龄26～68岁，平均年龄(50±10)岁；按照WHO病理分级：G1 12例，G2 20例，G3 13例；TNM临床分期诊断标准：非浸润性癌(Ta-1期)19例，浸润性癌(T2～4期)26例;单发24例，多发21例；初发29例，复发16例；正常膀胱组患者10例均为前列腺增生症、膀胱结石的膀胱黏膜组织且经病理证实，其中男7例，女3例；年龄27～69岁，平均年龄(51±9)岁。上述标本经4%多聚甲醛固定。

    1.2 试剂与仪器

    1.2.1 试剂：兔抗人Bcl-2多克隆抗体：SantaCruz公司；hanks(缓冲液)：百浩生物科技有限公司；AlexaFiuor488(异硫氰酸荧光素)：Proteintech公司：胃蛋白酶工作液：上海易欣生物科技有限公司

    1.2.2 仪器：BDFACSEALIBUR流式细胞仪BDBioscience公司(U.S.A)

    1.3 试验方法 应用流式细胞分析技术检测。

    1.4 试验步骤 在检测蛋白免疫荧光标记物时，设hanks(缓冲液)为阴性对照，二抗AlexaFiuor488(异硫氰酸荧光素)为阳性对照。具体操作步骤如下：

    1.4.1 标本蜡块的处理：在切片机上将蜡块包埋的组织切取3～5片40～50μm厚的组织片。

    1.4.2 脱蜡：将切取的组织片放入试管中，用二甲苯5～8ml(室温)浸泡2～3d ......