胶质瘤中间质细胞衍生因子-1及神经生长因子的表达及临床意义
免疫组化,脑组织,2结果,3讨论
张旭标 林涛 曾永亲 郑定容胶质瘤中间质细胞衍生因子-1及神经生长因子的表达及临床意义
张旭标 林涛 曾永亲 郑定容
目的 探讨间质细胞衍生因子-1(SDF-1)及神经生长因子(NGF)在胶质瘤中的表达及临床意义。方法 收集手术切除的人脑胶质瘤病理标本86例为观察组,其中观察组按不同病理级别分为Ⅰ级15例为Ⅰ组,Ⅱ级24例为Ⅱ组,Ⅲ级26例为Ⅲ组,Ⅳ级21例为Ⅳ组,同期随机选择颅脑外伤患者正常脑组织标本84例为对照组,2组组织均使用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测SDF-1与NGF mRNA,同时采用免疫组化法检测2组组织中SDF-1与NGF蛋白的表达情况。比较2组组织中SDF-1与NGF mRNA及蛋白表达情况。结果 观察组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于对照组(P1 资料与方法
1.1 一般资料 收集2012年1月至2015年1月广东三九脑科医院神经外科手术切除的人脑胶质瘤病理标本86例为观察组,男43例,女43例;年龄13~75岁,平均年龄(45.6±12.2)岁;患者术前未接受放化疗等治疗,均无其他肿瘤病史,均排除肝、肾、肺、心脏和血液性疾病,患者均有齐全完整的临床资料,所有病理标本均取出一部分成制作成石蜡切片,通过HE染色后,由病理科组织两名经验丰富病理医生进行双盲镜检读片,按2007版WHO制定的中枢神经系统肿瘤分类标准[4],对标本进行组织学及病理学分级,其中Ⅰ级15例为Ⅰ组,Ⅱ级24例为Ⅱ组,Ⅲ级26例为Ⅲ组,Ⅳ级21例为Ⅳ组,同期随机选择颅脑外伤后行颅内减压患者的手术中切取正常脑组织标本84例为对照组,男42例,女42例;年龄12~76岁,平均年龄(46.2±11.9)岁。2组年龄和性别比差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法 观察组患者组织标本为外科手术切取的脑胶质瘤标本,对照组患者组织标本为颅脑外伤手术切除的正常脑组织标本。2组均在术中各取2份标本,其中一份标本通过甲醛固处理备用,另外一份标本通过液氮固定处理备用。
1.2.1 免疫组化法检测:SDF-1和NGF表达检测:SDF-1和NGF表达的检测采用采用免疫组化SP法,步骤均严格按照试剂盒的说明书进行操作。结果标准判定:所有的免疫组化SP切片均由两位病理学主治医师以上的医师对的染色结果进行评定,在高倍镜下(400倍) 随机抽取5个视野,判断标准参照隋锐等[5]的计数方法计算阳性细胞率,阴性:比率51%。总阳性率:弱阳性率+阳性率+强阳性率。见图1 ......
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