张亮 陆磊 侯文洁 周秋云 丁红梓 王洁

    ·药物研究·

    优化高效液相色谱法检测万古霉素的血药浓度

    张亮 陆磊 侯文洁 周秋云 丁红梓 王洁

    目的建立人血浆中万古霉素的高效液相色谱检测方法，为临床给药方案提供参考。方法采用6%高氯酸沉淀血浆中的蛋白，以乙腈-0.05 mol/L三氟乙酸(22∶3)为流动相，流速1 ml/min，检测波长280 nm。结果万古霉素在1.56～100 μg/ml范围内线性关系良好,批内、批间准确度的偏差1 材料与方法

    1.1 仪器与试药 LC-20AB高效液相色谱系统(检测器为SPD-M20A，岛津，日本)； 电子分析天平(EB224，0.1 mg，上海舜宇恒平科学仪器有限公司)；高速离心机(TG1650-WS，上海卢湘仪)；万古霉素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：30360-200301)；注射用盐酸万古霉素(Eli Lilly Japan K.K，规格：0.5g，批号：MW19231)；乙腈(Merck,德国)为色谱纯，三氟乙酸(国药集团，中国)为分析纯，实验用水为MILLIPORE自制超纯水。

    1.2 方法

    1.2.1 色谱条件 色谱柱：CLC-ODS (250 mm×4.6 mm，5 μm，SMIMADZU，日本)；流动相：乙腈-0.05 mol/L三氟乙酸(3∶22)；柱温40℃；流速1 ml/min；检测波长280 nm；进样体积：20 μl。

    1.2.2 血浆样品处理 取血浆样品500 μl于EP管中，加入6%高氯酸300 μl，涡旋震荡1 min，15 000 r/min离心3 min后，取上清液经0.45 μm滤膜过滤后进样分析。

    2 结果

    2.1 专属性试验 按“2.1”项下色谱条件，万古霉素保留时间在8.6 min左右，峰形良好，血浆内源性物质对分析无干扰，无杂质峰干扰检测。见图1。

    2.2 标准曲线和定量下限 精密秤取万古霉素对照品适量溶于10 ml容量瓶中 ......