张贤莉 占义霞

    宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率在女性恶性肿瘤中居世界第二位，死亡率在女性恶性肿瘤中居世界第一位[1,2]。统计显示2008年全球宫颈癌新发病例为53万左右，2012年全球宫颈癌死亡人数为27万左右[3]。实体瘤的主要治疗手段为手术切除，宫颈癌的手术治疗主要用于宫颈癌早期患者，同时加以放化疗辅助治疗，而对于晚期侵袭转移和复发患者的治疗效果不佳[4]，目前缺乏有效的治疗方法，使得宫颈癌患者5年生存率仅有40%左右[5]，而宫颈癌的发病分子机制尚未完全阐明，在分子水平研究宫颈癌发病的关键分子，可能对治疗宫颈癌提供新的方法。长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度超过200个核苷酸的非编码转录本，在肿瘤发生发展的各个方面发挥关键作用[6,7]。有报道LINC01133在肺癌、胃癌、肝癌等常见肿瘤中发挥异常[8-10]，且调控重要的生物学功能，可能是肿瘤发生发展中的重要因子，Mao等[11]报道 LINC01133是预测宫颈鳞癌患者存活率低的15个高表达lncRNAs之一，在宫颈癌中的其他研究尚未见报道。本文研究LINC01133在宫颈癌组织中的表达水平及与患者临床特征的关系，同时以宫颈癌细胞株HeLa为研究对象研究LINC01133在宫颈癌细胞中具体的生物学功能及作用机制，旨在为宫颈癌分子靶向药物的发掘提供依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2012年12月至2017年12月入住我院行手术治疗的宫颈癌患者标本，要求患者未合并其他肿瘤或具有生命威胁的疾病，术前未进行放化疗、靶向治疗等抗肿瘤治疗，并且具有完整的病例和随访资料，由病理专家证实为宫颈癌，共获得宫颈癌手术切除标本60例，另选取40例由于良性病变等原因获得的正常宫颈组织为对照。患者签署知情同意书，并由医院伦理委员会审核通过。

    1.2 试剂与仪器 宫颈癌细胞系HeLa、caski、siha和人宫颈上皮永生化细胞H8购自美国ATCC细胞库；DMEM高糖、RPIM-1640、DMEM-F12培养基及FBS均购自美国Gibco公司；反转录、qRT-PCR试剂盒等购自日本TaKaRa公司；LINC01133 siRNA由上海吉凯有限公司设计合成；蛋白裂解液购自美国Thermo公司；MTS增殖试剂盒购自美国biovision公司；Transwell小室购自美国corning公司； pPI3K抗体(ab125633)、pAKT抗体(ab38449)、GAPDH抗体(ab181602)购自美国Abcam公司 ......