饶兵

    乙型肝炎病毒(chronic hepatitis B virus,HBV)是一种嗜肝型DNA病毒，可导致肝脏纤维化、肝硬化、慢性乙型肝炎、甚至发展成为肝细胞癌。目前，全球感染HBV的患者约有2.4亿人，呈现全球流行疾病，而每年HBV致死人数达到65万[1]。在中国慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者人数达到了2 000万[2]。到目前为止，已明确HBV免疫功能低下是诱发CHB的主要病理基础。慢性HBV感染的慢性肝脏炎症及相关病理表现为多种白细胞浸润，包括活化的巨噬细胞。HBV能够促进巨噬细胞的活化和M2极化[3,4]。巨噬细胞是细胞凋亡的主要清除者，然而多种免疫紊乱都可导致巨噬细胞自身的异常凋亡，已明确HBV感染激活异常免疫反应从而损伤肝组织的同时，导致巨噬细胞成为免疫活性细胞的靶细胞或诱发自身凋亡导致巨噬细胞的进一步耗竭[5,6]。然而，HBV感染和巨噬细胞的凋亡之间的内在机制仍不清楚。腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)的激活参与调控多种细胞凋亡的促进[7]，AMPKα是AMPK的5’端的催化亚基，是哺乳动物细胞中最广泛表达的AMPK亚型之一[8]。研究发现激活AMPK可以抑制氧化低密度脂蛋白低密度脂蛋白(oxidised low-density lipoprotein，OX-LDL)诱导的巨噬细胞增殖，而且1 mmol/L的AMPK激活剂AICAR 可促进巨噬细胞凋亡[9]。但是，到目前为止仍不清楚AMPK信号的激活是否参与HBV感染导致的巨噬细胞凋亡。MALAT1是一段广泛存在于哺乳动物体内的保守长链非编码RNA序列，已被证实在选择性剪接和基因表达等表观遗传调控中发挥重要作用[10]。MALAT1与多种病理过程密切相关，包括癌细胞和非癌细胞的增殖和凋亡等[11]。研究发现HBx在HCC组织可诱导MALAT1的表达[12]，而且已发现MALAT1的高表达可能和AMPK的激活密切相关[13]。因此，推测MALAT1高表达和AMPK激活在HBV介导的巨噬凋亡中可能扮演重要角色。本研究旨在探讨MALAT1和AMPK激活在HBV感染后巨噬细胞凋亡的功能和机制，为乙肝疾病治疗探索新的潜在靶点。

    1 材料与方法

    1.1 材料 收集2015年10月至2016年10月于我院进行体检的HBV-DNA阳性者及HBV-DNA阴性者共130例外周血单核巨噬细胞，分析lncRNA-MALAT1的表达差异。本研究中涉及到的志愿者均签订知情同意书 ......