沈兰 陈春华 叶冬云 南方

    宫颈癌在中国是女性中第二位常见的癌症，是女性因癌症死亡的重要原因[1]。宫颈癌早期阶段采用手术治疗，而局部晚期(FIGO分期ⅡB/Ⅲ)的主要治疗方法是化学放射治疗。患者的总体和无病生存取决于肿瘤分期，而在给定的FIGO分期内，这将取决于肿瘤对治疗的反应[1]。在我们的设置中，大多数患者存在局部晚期疾病，并接受化学放射治疗。因此，重要的是能够预测这一群体的治疗反应，并确定那些对化学放射治疗(化学放射抗药性)反应较差的人，他们的替代方法可能具有潜在价值。DNA甲基化异常是癌症的特征之一，全球低甲基化和区域基因启动子高甲基化是已知的致癌事件[2]。因此，DNA甲基化谱可以作为判断预后的生物标志物和预后的预测因子。然而，关于基因启动子甲基化作为宫颈癌预测指标的数据是有限的。我们对文献进行研究，选择了6个基因，即雌激素受体1(ESR1)、早发期1型乳腺癌(BRCA1)、RAS-关联域族1异构体A (RASSF1A)、变异同系物1 (MLH1)、肌源性分化1 (MYOD1)和人端粒酶逆转录酶 (hTERT)，据报道，在浸润性宫颈癌中甲基化的频率为20%～70%[3]。我们排除那些很高或很低频率的启动子甲基化的基因，因为它们可能没有预测价值[4]。选择的基因具有不同的细胞功能，参与细胞分化(ESR1)[5]、细胞增殖(RASSF1A、MYOD1)[6]、放疗/化疗后DNA修复(MLH1、BRCA1)[7]和永生化(hTERT)[8]的调控。本研究推测，这些基因的启动子甲基化状态或转录水平可能与侵袭性宫颈癌对化学放射的整体反应有关，本研究目的是评估ESR1、MYOD1和hTERT基因启动子甲基化谱和相应的转录本表达情况，以确定能够预测化学放射治疗患者的反应基因。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 本研究是在伦理委员会批准后进行的，审批标准依据1975年赫尔辛基宣言(2000年修订)在细胞学系分子病理学实验室进行的。此项研究获得受试者知情同意，并在2015年1月至2018年11月招募149例患者的连续队列，其中41例因社会和经济原因而退出。取常规的宫颈活检进行组织病理学诊断，其中小部分组织切片被快速冷冻并保存在-80℃。对70%以上肿瘤组织进行冰冻切片/触摸印迹涂片鉴定后，对标本进行分子分析。诊断时患有Ⅳ期疾病的患者、接受过任何形式治疗的患者和无法完成整个治疗过程的患者都被排除。排除41例后，108例浸润性宫颈癌(年龄27～70岁)在FIGOⅡB/Ⅲ期符合本研究的纳入标准。

    1.2 治疗方案与患者随访 化学放射治疗采用四野箱照射技术 ......