参麝活络丸对脑缺血再灌注损伤大鼠脑神经元凋亡的影响
尼莫地平,1材料与方法,2结果,3讨论
赵丽华 莲花 康晓娜 乌兰图雅脑是人体对缺氧最为敏感的器官,短期不完全性缺血只引起可逆性损害,而长时间的完全缺血或严重缺血会引起梗死,最明显的组织学变化是脑水肿及脑细胞坏死。脑缺血-再灌注可造成脑功能严重受损。参麝活络丸是由大活络丸加减变化而成,由麝香、红参、熟地黄、乌梢蛇(制)、羌活、全蝎、当归、蕲蛇(制)、茯苓、两头尖、白术(炒)、草乌(制)等中药组成,其功效为舒筋活络,祛风豁痰。临床可用于治疗脑缺血性中风后遗症。临床人拟用量为4 g生药/d(0.058 g生药·kg-1·d-1,按70 kg体重计算)。本文对该剂进行了与功能主治有关的主要药效学试验。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级SD大鼠60只,雌雄各半,体重180~200 g,由内蒙古医科大学实验动物中心提供[许可证号:SCXK(蒙)2016-0001]。大鼠于实验动物屏障系统内饲养,室温20~25℃,光照时间08∶00~20∶00。实验过程遵循中华人民共和国科技部《关于善待实验动物的指导性意见》。
1.2 主要试剂与仪器 (1)药物参麝活络丸:口服,1丸/次,3次/d,规格:3 g/丸,1 g颗粒含0.45 g生药(湖北明和药业有限公司,批号:20160421)。尼莫地平片:口服,1~2片/次,3次/d;规格:30 mg(拜耳医药保健有限公司,批号:BJ33125)。(2)试剂甲苯胺蓝:批号528A027,北京Solarbio科技有限公司。青霉素:华北制药股份有限公司,批号:F7038619。多聚甲醛:批号:F20161203,国药集团化学试剂有限公司。TMS-P超敏试剂盒:批号:1612031406,福建迈新生物技术开发有限公司。PBS磷酸缓冲液:批号:20160722,北京Solarbio科技有限公司。枸橼酸钠:枸橼酸国药集团化学试剂有限公司。细胞色素C、Apaf1、Caspase-9、Caspase-3,博士德生物。DAB显色试剂盒:福建迈新生物技术开发有限公司。水合氯醛:北京市旭东化工厂,批号20000530。(3)仪器电热恒温培养箱:厦门医疗电子仪器厂。Nikon130285型光电显微镜。数字式pH值计:上海日岛科学仪器有限公司。YG-280型烤片机:阳光神琦医用科技有限公司。ZA120R4型万分之一天平:上海赞维衡器有限公司。YG-280KX摊片机:湖北孝感市阳光神琦医用科技有限公司。Leica切片机:德国(徕卡)生产。
1.3 动物分组 60只SPF级SD大鼠按体重分为假手术组、模型组、参麝活络丸低剂量组(0.37 g生药/kg)、参麝活络丸中剂量组(0.74 g生药/kg)、参麝活络丸高剂量组(1.48 g生药/kg)、尼莫地平片组(8.10 mg/kg) ......
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