庞真贞 李硕 刘钦赞 李晔 王良

    牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)具有多向分化的潜能，除了能形成矿化结节能力的细胞外，经过不同细胞因子的诱导，还能够分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、血管内皮、肝、神经等细胞系类型[1,2]。牙髓干细胞有以下优点，来源丰富，6～11岁自然脱落的牙齿中、成人需要拔掉的牙齿中均有丰富的牙髓干细胞[3,4]，因此无伦理争议。本文分析乳牙与恒牙牙髓中唾液腺分泌相关分子水平，分析其是否具有治疗唾液腺分泌功能低下的临床价值。报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2018年1～12月的6～11岁脱落乳牙10颗与18～25岁因正畸拔除的完整磨牙10颗，牙齿健康，患者及家属对治疗方法知情同意，对本研究知情同意。排除标准：合并龋齿、根尖病、牙周病。试剂及仪器：20%胎牛血清，DMEM，细胞筛网。

    1.2 干细胞纯化扩增

    1.2.1 牙髓干细胞：取上述刮牙周膜组织牙齿，切开牙冠，暴露牙髓，取出牙髓，浸入3倍双抗PBS中，后续操作同上，待细胞汇合至80%，传代。

    1.2.2 细胞纯化、扩增：分别收集培养的处于对数生长期的牙周膜细胞与牙髓细胞上清液，作为适应性培养基；对培养细胞消化、离心、去上清，加适应性培养基，吹打，过细胞筛，制成单个细胞超过悬液90%，调增细胞密度为每毫升10～15个，接种与96孔培养板，每孔100 μl，培养24 h、48 h，标记单个细胞孔，补至每孔200 μl，第6天，半量换液，随后每3天换1次。7～14 d，细胞数≥50为出现细胞克隆，待克隆细胞至孔底1/2～2/3后 ......