邹蕾 黄志远 杨桥 金红旭

    作为一种常见的外科急腹症，重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)的主要病理特征为胰腺弥漫性出血和组织坏死，并伴有全身性免疫功能紊乱，其发病急骤、病情凶险、进展快、预后差、病死率高[1,2]。关于其发病机制目前尚不完全清楚，但有观点认为胰腺消化酶的激活导致胰腺自身发生消化，期间胰腺细胞和间质出现水肿，使全身炎性反应瀑布系统被激活，最终引发全身炎性反应综合征(systemic inflammatory respone syndrome,SIRS)以及多器官功能衰竭(multiple organ failure，MOF)而导致机体死亡[3,4]。免疫过激引发的全身炎性反应综合征和多器官功能障碍综合征所致的早期死亡，以及免疫抑制引起感染加重所致的疾病后期死亡是该病死亡的两个高峰[5]。作为中草药大黄的有效成分，大黄素(Emodin，EMO，1,3,8-三羟基-6-甲基-9,10-蒽醌)是一种广泛存在于大黄、芦荟、虎杖等蓼科药用植物中的羟基蒽醌类化合物。近年来大黄素被证实对重症急性胰腺炎有较好的治疗效果[6]。然而，关于其对淋巴细胞影响的报道笔者所见仍不多见，因此，本研究以重症急性胰腺炎大鼠为实验模型，探讨大黄素对淋巴细胞功能的影响及可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物、试剂与仪器 45只SPF 级健康雄性SD大鼠，采购自北京维通利华实验动物技术有限公司,合格证号SCXK(京)2012-0001，体重200～240 g，于北京维通利华实验动物技术有限公司采购，于60%～65%湿度、20～24℃室温，日光灯每天照射12 h以维持昼夜循环，适应性饲养1周，期间让其自由饮水饮食。牛磺胆酸钠和大黄素均于美国Sigma公司采购；CD3FITC、CD8PE、CD45Percp、CD4APC、CD16+56PE、CD19APC抗体、PE荧光直标大鼠Foxp3 检测试剂盒、大鼠 Bregs 流式试剂盒均购自美国eBscience公司；大鼠淋巴细胞分离液购自天津灏洋；白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)检测试剂盒购自Abcam。OLYMPUS BX50型光学显微镜；Eppendorf Centrifuge 5430R/5417R型离心机；流式细胞仪；Biosystems 7500 Fast Real-Time PGR System型PCR仪 ......