治中颗粒对脑缺血再灌注模型大鼠颞叶神经元凋亡的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
王龙 张勇 黄燕 席丽娜 张明 吕建瑞动脉硬化性脑梗死是指大脑中动脉系统的动脉粥样硬化和血栓形成使动脉管腔狭窄,导致该动脉供血区局部脑组织的坏死,临床上表现为偏瘫、讲话不清等突然发生的神经功能缺损症状[1]。该病为最常见的脑血管病,中医药治疗脑栓塞有丰富的临床经验,治中颗粒出自《备急千金要方》卷二十治中汤,主要成分为人参、干姜、甘草、(炙)、白术各9 g,用水1.6 L,煮取600 ml,去滓,每次温服200 ml,3次/d。治五脏中寒,口噤失音,四肢强直。本文对该剂进行了与功能主治有关的药效学试验。
1 材料与方法
1.1 试验动物 SPF级雌性SD大鼠70只,体重180~220 g;由西安交通大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(陕)2015-002。大鼠昼夜循环光照,饲养在温度19~28℃,相对湿度40%的洁净环境中,喂食双蒸水和购于动物中心的大鼠饲料,大鼠自由饮水和进食。
1.2 受试药物 治中颗粒,用法用量:口服,5 g/次,3次/d;规格:5 g/袋,每袋相当于12 g生药;由西安交通大学附属第二医院提供,批号:20171103。银杏叶片,用法用量:口服:2片/次,3次/d;规格:0.2 g;石家庄以岭药业股份有限公司,批号:170116。
1.3 试剂 枸橼酸钠,批号:20160718,国药集团化学试剂有限公司。枸橼酸,批号:20160313,国药集团化学试剂有限公司。PBS磷酸缓冲液,批号:20180221,北京Solarbio科技有限公司。大鼠含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)一抗,13A111,博士德生物工程有限公司。大鼠凋亡诱导因子(AIF)一抗,13F57,博士德生物工程有限公司。多聚甲醛,批号:F20160417,国药集团化学试剂有限公司。TMS-P超敏试剂盒,批号:1703261406,福建迈新生物技术开发有限公司。DAB显色试剂盒,批号:1705110031福建迈新生物技术开发有限公司。
1.4 仪器 YG-280KX型阳光神琦摊片机。YG-280KX型阳光神琦烤片机。TP1020型徕卡自动脱水机。Leica切片机。BX53型奥林巴斯光电显微镜。
1.5 研究方法
1.5.1 动物分组、造模、给药方法:70只SPF级SD大鼠随机选取10只为假手术组,其余60只大鼠随机分为模型组、治中颗粒低剂量组(3.24 g生药/kg)、治中颗粒中剂量组(6.48 g生药/kg)、治中颗粒高剂量组(12.96生药/kg)、银杏叶片组(0.108 g/kg) ......
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