梁焱 方晏红 沈强

    白内障在世界范围内具有较高的发病率，是获得性致盲性眼病的首要原因[1-3]。探讨白内障的发病机制是降低白内障发病率和致盲率的关键[4]。晶状体上皮细胞凋亡是白内障发生的早期事件，研究发现年龄相关的皮质核白内障上皮细胞凋亡率高，且aspase-3、Bax/Bcl-2高表达。晶状体上皮是紫外线暴露的主要靶点，紫外线照射诱导的晶状体上皮细胞凋亡被用作研究白内障发病机制的体外模型[5]。MicroRNA，也称为miRNA，是动物和植物中广泛存在的一种非编码短链RNA。miRNA可通过降解RNA并通过完全或不完全匹配的靶基因抑制蛋白质翻译来发挥其调节功能[6,7]。最近的研究表明， miR-126b参与了晶状体上皮细胞的凋亡和增殖。据报道，miR-126b在癌症中上调并促进细胞凋亡[8]。越来越多的证据表明异常的VEGF表达与几种人类疾病有关，例如癌症[9]。最近，VEGF被发现在眼睛发育和疾病中起关键作用。VEGF在白内障晶状体上皮细胞中的作用尚不清楚[10]。本研究拟探讨白内障晶状体上皮细胞中miR-126和VEGF的表达关系及意义，为白内障的治疗提供理论及临床依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 本研究纳入了2015年11月至2018年11月重庆市江津区中心医院和重庆市合川区人民医院收治的白内障患者198例(无其他眼疾)作为病例组。白内障患者在白内障手术中获得了新鲜的晶状体前囊。正常晶状体前囊膜标本(来自膜移植中供体眼球的透明晶状体及高度近视透明晶状体摘除术的患者)49例作为对照组。所有晶状体标本为中心前囊，直径约5～6 mm，使用CCC连续环形撕囊术获得。对照组未发现白内障或任何其他眼病。病例组，男80例，女118例；平均年龄(65.45±8.65)岁。对照组，男22例，女27例；平均年龄(66.85±9.43)岁。该研究方案经重庆市江津区中心医院伦理委员会批准。所有试验按照赫尔辛基宣言进行。患者及家属对本次研究知情，并签署知情同意书。

    1.2 晶状体中MIR-126、VEGF mRNA的测定 通过实时荧光逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)对MIR-126、VEGF进行RNA提取和定量。将所有组织样品在TRIzol试剂(Invitrogen; Thermo Fisher Scientifc，Inc.，Waltham，MA，USA)中匀浆，并根据制造商的说明分离总RNA。使用PrimeScript RT试剂盒(RR037A; Takara Biotechnology Co. ......