孙永 孙辉 姚凯华 李志锋 李永文

    缺血性脑血管病因其具有高发病率、高致残率、高死亡率和高复发率等特点对人类的生命和健康威胁甚大，已成为危害人类生命的第三大杀手[1]。脑缺血性损伤是缺血性脑血管病中重要的病理生理过程[2]。阿司匹林是临床最常用的具有解热镇痛的非甾体类抗炎药物；研究表明阿司匹林可增强脑部血流循环，防止因脑缺血造成脑梗死的发生[3]。另有研究表明，阿司匹林还可改善缺血部位的能量代谢，参与抑制神经细胞的凋亡过程[4]。近年来，研究发现JAK/STAT信号转导通路与脑缺血有密切关联，是调节脑缺血后肿瘤坏死因子-α、白介素等造成脑缺血后细胞损伤的细胞因子反应的关键通路[5]。JAK2/STAT3通路的激活可能介导缺血脑损伤神经元的凋亡过程。阿司匹林对脑缺血损伤大鼠JAK/STAT信号通路的影响笔者所见鲜有报道。因此本实验通过建立大鼠局灶性脑缺血性损伤模型，研究大鼠局灶性脑缺血性损伤后以及不同浓度阿司匹林干预后JAK2、磷酸化 JAK2(pJAK2)、STAT3、磷酸化 STAT3 (pSTAT3)蛋白水平表达变化及神经细胞凋亡的情况，旨在探讨阿司匹林对脑缺血性损伤大鼠JAK/STAT信号通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 12～15周龄的无特定病原体(specific pathogen free，SPF)级健康SD雄性大鼠100只(合格证号：SCXK京2006-0009)，体重200～220 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司；阿司匹林购自上海先声药业有限公司；JAK2、pJAK2、STAT3、pSTAT3 多克隆抗体均来自美国 Bioworld 公司；辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔/兔抗小鼠IgG购自美国 Sigma公司，小鼠抗大鼠 β-actin抗体、TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒 、DAB显色试剂盒购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司；磁共振扫描仪购自德国西门子公司；凝胶成像仪购自美国Bio-Rad公司；BXM-950光学显微镜购自上海炳宇光学仪器有限公司；CM1850石蜡切片机购自北京德泉兴业商贸有限公司；蛋白印迹设备购自美国Bio Rad公司。

    1.2 模型构建与分组处理 将80只大鼠进行编号，随机分为4组，每组20只，分别为假手术组、模型组、阿司匹林低剂量组(10 mg/kg)、阿司匹林高剂量组(50 mg/kg) ......