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编号:277146
胰高血糖素样肽-1对高糖条件下肾小球血管内皮细胞损伤的调节作用及机制研究
http://www.100md.com 2020年5月15日 河北医药 2020年第8期
氧化应激,1材料与方法,2结果,3讨论
     黄强 韩强

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者常见的微血管并发症、也是导致终末期肾脏病的主要病因。近年来,我国糖尿病的发生率逐年升高且糖尿病患者的血糖控制达标率较低,这也直接导致了DN发患者数的增加[1,2]。DN的发病机制复杂,其中高糖环境下肾小球系膜细胞增生、内皮细胞损害、细胞外基质增厚及重塑是公认的与DN发生直接相关的病理环节,针对以上病理环节进行干预也是DN治疗的潜在靶点。胰高血糖素样肽-1(glucagon like peptide-1,GLP-1)是由空肠和回肠L细胞分泌的小分子多肽,能够以葡萄糖依赖性的方式刺激胰岛素分泌并起到降糖作用。新近的多项细胞实验研究证实,GLP-1对高糖、过氧化氢、缺氧等病理因素引起的内皮细胞损伤具有保护作用[3-5],也有动物实验证实GLP-1对糖尿病大鼠的肾功能具有改善作用,但GLP-1是否能够减轻高糖环境下肾小球内皮细胞的损伤尚未明确。为此,本研究选择人源肾小球微血管内皮细胞(HRGEC)作为实验对象,具体分析了GLP-1对高糖条件下HRGEC损伤的调节作用及机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验试剂:HRGEC细胞购自ATCC公司,DMEM培养基、胎牛血清(FBS)、青霉素、链霉素、胰蛋白酶均购自Gibco公司,GLP-1购自Sigma公司,TUNEL染色试剂盒、一氧化氮(NO)检测试剂盒购自上海碧云天公司,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)检测试剂盒购自南京建成研究所,培养细胞/细菌总RNA提取试剂盒、FastKing一步法除基因组cDNA第一链合成预混试剂、Talent荧光定量检测试剂盒购自北京天根公司。

    1.1.2 实验仪器:细胞培养箱、高速离心机购自Thermo公司,荧光显微镜购自Nikon公司 ......

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