周颖 罗婷 袁韵 龚玉萍

    弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是成人最常见的非霍奇金淋巴瘤(NHL)，约占NHL的30%～40%[1]。目前，R-CHOP是DLBCL的标准治疗方案，治愈率可达到60%[2]。尽管R-CHOP的成功治疗效果有所改善，但复发和难治性疾病的患者仍是该疾病治疗的一大挑战。近年来，高通量技术揭示了DLBCL基因改变的更复杂特征，并发现了新的治疗途径。DLBCL靶向治疗的候选通路之一是STAT3通路[3]。STAT3在包括血淋巴样恶性肿瘤在内的许多癌症中被活化[4]。STAT3激活， 活化的STAT3(phospho-STAT3,p-STAT3)进入细胞核，导致细胞凋亡、增殖[5]。免疫组化检测到的STAT3或p-STAT3单独表达是所有DLBCL患者的不良预后因子[6]。S1pr1是鞘氨醇-1-磷酸(S1P)G蛋白偶联受体的成员，通过调控ERK、Akt和Rac通路分别引起细胞增殖和迁移等多种生物学效应[7]。最近有据报道显示，S1pr1也转录p-STAT3和增强S1pr1随后地激活STAT3，建立一个积极的反馈回路，包括S1pr1/p-STAT3途径，这对于小鼠和人实体瘤以及肿瘤相关骨髓细胞STAT3的持续激活至关重要[8]。霍奇金淋巴瘤(HL)和NHL在细胞系或组织中均有S1pr1的表达，提示S1pr1在这种情况下具有潜在的生物学作用[9]。然而，S1pr1在DLBCL患者中的预后研究鲜有报道。本研究通过沉默OCI-LY1细胞中S1pr1基因的表达，观察OCI-LY1细胞增殖和迁移情况，并初步探讨其可能的机制，为 DLBCL 的治疗提供一个新的思路。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料、试剂及仪器 人DLBCL OCI-LY1细胞 (中国科学院典型培养物保藏中心昆明细胞库)；S1pr1特异性siRNA和阴性对照(negative control，NC)(上海吉玛生物科技有限公司)；DMEM 培养基、胰酶、胎牛血清(美国Gibco公司)；细胞计数试剂盒8(CCK-8)(美国Amresco公司)；人淋巴细胞分离液(上海博升生物科技有限公司)；Trizol(美国Invitrogen公司)、PrimeScript RT reagent Kit Perfect Real Time RNA反转录试剂盒(大连TaKaRa公司)、UltraSYBR One Step RNA PCR Kit荧光定量PCR试剂盒(宝生物工程大连有限公司)；PCR引物序列设计和合成(大连TaKaRa公司) ......