王学培 翟杨生 韩雪华

    作为临床最常见的恶性消化道肿瘤之一，食管癌(esophageal cancer,EC)具有发生发展迅速、侵袭范围广、转移速度快、病死率高的特点[1]。依据现今的外科医疗条件，早期EC可通过根治性手术切除得到理想的治疗效果[2]，而晚期EC一般采用手术与化疗相辅助的治疗方案，但是EC患者的术后再次复发以及癌细胞的不可控性转移是导致EC患者死亡的最重要的因素之一[3]。随着分子病理学在临床应用技术上的突破，肿瘤细胞侵袭、转移相关的分子研究逐渐应用在EC的诊断、治疗中[4]。恶性肿瘤的基本特征就是侵袭和转移，肿瘤相关蛋白1(metastasis-associated gene 1，MTA1)作为肿瘤转移相关基因，其在多种肿瘤中过表达，且与肿瘤侵袭和肿瘤血管形成有关[5]。有文献报道称实体肿瘤发生的主要因素就是缺氧，局部缺氧会诱导激活缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)等，进而开启血管生成开关，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路被激活，进而刺激血管和淋巴管生成[6]。有报道MTA1在大肠癌中表达与HIF-1α呈正相关，且能通过调节VEGF促进淋巴管生成[7]。而在EC中其促进转移的机制笔者尚未见报道。本研究探讨MAT1在EC中的表达，并探讨肿瘤发生发展过程中的作用机制，旨在为临床诊治EC提供新的靶点。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2016年3月至2018年5月于我院接受手术治疗的62例EC患者癌组织及距离癌组织>2 cm处的正常组织，所有病例标本经组织病理学检测证实为原发性EC，其中腺癌32例，鳞癌30例；年龄35～76岁，中位年龄55岁。所有患者同意本研究并签署知情同意书，且经医院伦理委员会审核。

    1.2 细胞及主要试剂和仪器 人正常食管上皮细胞HET-1A，人食管癌细胞株Eca-109、SHEEC1、Ec-9706、EC8712、TE-1均购自上海博古生物技术有限公司。慢病毒过表达载体RSK4-MTA1及阴性对照RSK4-NC由上海吉玛生物技术有限公司提供；DMEM培养基(TOYOBO)；Trizol 试剂盒(TaKaRa)；Ⅰ、Ⅲ型胶原兔多克隆抗体(美国Abcamn公司)，MTA1抗体、HIF-α抗体、VEGF抗体、鼠抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、辣根过氧化物酶标记的IgG二抗(美国Jackson公司)，Transwell小室(美国BD公司)；CCK-8试剂盒、反转录试剂盒、Western blot试剂盒(美国migma公司)全蛋白抽提试剂盒(德国QIAGEN公司) ......