高伟年 张文立 郭娜 陈子英 赵曙光 于丁 闫芳 廖红娟 崔红占 孙涌泉

    心脏必须不断地泵血，为身体提供氧气和营养，这一过程需要消耗大量的能量。因此，心脏具有多个复杂的生物系统，以适应系统需求的变化[1]。心肌肥厚是应对各种内在或外在刺激后的一种生理或病理状态的心脏反应。心肌肥厚的发生是促肥大因子和抗肥大因子失衡的结果[2]。维持促肥大因子和抗肥大因子之间的平衡在治疗心肌肥大方面具有很大潜力[3]。然而，心肌肥厚发生的机制尚不清楚。泛素特异性蛋白酶1(USP1)是去泛素化酶家族中的重要一员。USP1和USP1相关因子(UAF1)形成稳定复合物，促进USP1活性，USP1/UAF1复合物去泛素化FANCD2蛋白参与范可尼贫血通路的DNA损伤修复[4,5]，调节PCNA泛素化参与损伤合成[6]。并且USP1 在多种肿瘤中高表达，提示可能与肿瘤的发生发展有关[7-9]。但是，USP1在心肌肥厚中的作用尚不清楚，本研究旨在探讨USP1在心肌肥厚中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级出生72 h的SD乳鼠20只，雌雄不限，购自北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)-2016-0006]。10只SPF级的C57BL/6雄性小鼠，8～12周，22～25 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)-2016-0006]。无菌手术在实验动物中心进行[SYXK(冀)2018-008]。实验动物使用按照3R原则给与人道的关怀照顾。

    1.2 主要试剂与仪器 主要试剂：异丙肾上腺素(批号：20061109)购自济南科汇药业有限公司；引物由Primer 5.0软件设计，由华大基因公司合成；shRNA由北京唯创博精生物科技有限公司设计合成并包装腺病毒；RIPA Lysis and Extraction Buffer(货号：89900)、蛋白酶抑制剂(货号：A32965)、TRIzol(货号：15596018)和磷酸酶抑制剂(货号：A32957)均购自Thermo公司；cDNA 逆转录试剂盒(货号：KR106)和SuperReal荧光定量预混试剂(货号：FP216-02)和极超敏ECL化学发光试剂盒(货号：P0018FS)购自北京天根生物科技有限公司；USP1(货号：ab108104)和GAPDH(货号：ab181602)一抗均购自Abcam公司；BCA蛋白定量试剂盒(货号：P0012)、辣根酶标记山羊抗兔IgG(货号：A0208)购自碧云天生物技术有限公司。主要仪器：实时定量PCR仪(Bio-Rad ......