三氧化二砷诱导多发性骨髓瘤细胞U266自噬及凋亡作用研究
线粒体,1材料与方法,2结果,3讨论
谢佳 张晓波 温静 王浩 任婧婧 李光 张韵洁 宋艳萍多发性骨髓瘤是以恶性浆细胞克隆性增殖为特点的造血系统恶性肿瘤,尽管新一代蛋白酶体抑制剂和免疫调节衍生物的出现使得多发性骨髓瘤治疗取得一定发展,但由于其克隆异质性及其周围骨髓微环境的相互作用,治疗后出现耐药的几率仍然较高[1,2]。此外。药物毒性作用所致的相关的疾病如感染和神经病变,也降低了患者生活质量。故而,探讨高效、低毒的抗骨髓瘤药物在临床上具有重要的临床意义。三氧化二砷(As2O3)作为药物用于治疗疾病已具有上千年历史,也逐渐开始应用于肿瘤治疗。20世纪90年代研究发现As2O3砷没有严重的骨髓抑制毒性并对急性早幼粒细胞白血病有极好的疗效[3]。最新的研究也发现As2O3具有一定的抗多发性骨髓瘤的作用,具有用于复发难治患者的治疗潜力但具体的相关机制尚不明晰[4,5]。故而,本研究探讨了As2O3诱导多发性骨髓瘤细胞U266自噬及凋亡的作用,旨在为临床As2O3治疗多发现骨髓瘤提供数据参考,报道如下。
1 材料与方法
1.1 细胞株 选取多发性骨髓瘤细胞株U266细胞,购自上海赛默尔飞生物科技有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养:细胞株复苏,胎牛血清(15%)的培养液中重悬,5%CO2、37℃的饱和湿度培养箱传代培养。
1.2.2 MTT法:每孔2×105/m密度接种于96孔板,每孔培养液200 μl过夜后分别加入三氧化二砷,调整浓度为0.3 μg/ml、0.6 μg/ml、1.2 μg/ml As2O3,对照组加入0.9%氯化钠溶液,分别于0、24、48级72 h加入20 μl/孔的MTT,离心后弃上清液,加入150 μl/孔的二甲亚砜,酶联免疫法读取酶标仪490 nm处吸光度,每组设4个相同条件的平行孔,3次重复试验 ......
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