夏培 熊宇 张万里 田爱霞 丁祥武 胡艳艳

    胃癌是常见的恶性肿瘤之一，其病死率在所有恶性肿瘤中占据第二，仅次于肺癌[1]。基因的异常表达是胃癌发生发展的本质原因，包括原癌基因的激活、抑癌基因的失活等[2]。因此，从分子水平阐明胃癌的发生发展过程，探寻可靠的早期诊断标志物和新的治疗策略具有重要意义。人类转录因子叉头框Q1(forkhead box Q1，FOXQ1)基因属于Fox转录因子家族，是一种转录调控因子，其编码的蛋白质由403个氨基酸组成。FOXQ1的生物学功能已在毛囊分化中得到明确鉴定[3]。近年来研究发现FOXQ1在肺癌、结直肠癌、胶质瘤中异常表达，且与肿瘤生长、转移及预后显著相关[4-6]。近期研究表明，FOXQ1在胃癌组织的表达显著高于癌旁组织，且与胃癌病理分级、临床分期及淋巴结转移密切相关[7]，然而，FOXQ1的高表达是否有助于胃癌的发展和进展尚不清楚。SHH信号通路参与细胞分化、增殖、凋亡以及器官形成等过程[8,9]。近期发现FOXQ1基因可介导大肠癌SW480细胞血管生成与SHH信号通路有关[10]。本实验首先检测了胃癌细胞系中FOXQ1基因表达水平，并通过沉默胃癌SGC-7901细胞FOXQ1基因，观察该基因对SGC-7901细胞凋亡和SHH信号通路相关蛋白的影响，探讨其是否介导SHH信号通路影响胃癌细胞的凋亡。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株、主要试剂 人永生化胃黏膜上皮细胞GES-1及人胃癌细胞SGC-7901、MKN-28、GC-9811和AGS购自上海中科院细胞库，RPMI-1640培养基、胎牛血清购自美国Hyclone公司，Trizol试剂、Lipofectamine 2000转染试剂、SYBR Green PCR Master Mix试剂盒购自美国Invitrogen公司，BCA蛋白浓度检测试剂盒、AnnexinⅤ-FITC凋亡检测试剂盒购自碧云天生物技术研究所，非特异性FOXQ1 siRNA和非特异性FOXQ1 siRNA购自上海吉玛制药技术有限公司，Bax、Cleaved Caspase3、SHH、Smo、Gli1和Gli3抗体及辣根过氧化酶标记的二抗购自美国Abcam公司 ......