梁卫勤 林智

    鼻咽癌是人体内分泌器官中最为常见的肿瘤类型，发病率逐年递增，具有隐匿性强、进展缓慢的特点，部分患者在初次诊断时已发生转移[1-3]。文献报道，鼻咽癌的发生和癌基因的活化表达相关，因此揭示鼻咽癌相关的基因和调控机制对治疗鼻咽癌具有极其重要的意义[4]。长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA，lnc RNA)曾被认为不发挥实际作用，近年来有研究发现，其在肿瘤细胞周期、肿瘤细胞侵袭转移与化疗耐药等相关的信号通路方面均发挥调节作用[5-8]。作为lnc RNA家族成员之一，非编码RNA——NEAT1已被证实在多种疾病的发生发展过程中具有分化调控的作用[9-11]。鼻咽癌的发生发展中有诸多非编码RNA、抑癌基因、促癌基因及蛋白因子的参与，但目前关于NEAT1在鼻咽癌中的作用研究报道甚少，其是否能够调节鼻咽癌细胞的放疗敏感性笔者尚不清楚。因此，本研究通过对鼻咽癌组织和细胞株的研究，探讨NEAT1对鼻咽癌细胞辐射敏感性的分子机制，为新型靶向药物的研发提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 组织标本 48例临床鼻咽癌组织及对应的癌旁组织来自2018年1月至2019年1月于我院接受手术治疗的鼻咽癌患者，男26例，女22例；年龄36～65岁，中位年龄52岁；病程3～15周，平均病程(7.2±1.2)周；根据美国癌症联合会(AJCC)中鼻咽癌病理分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期15例，Ⅲ期10例，Ⅳ期7例；患者同意本研究并签署知情同意书，且经医院伦理委员会审核批准。

    1.2 实验材料 鼻咽癌细胞株SUNE-1、5-8F、C666-1、CNE-1、CNE-2均购自美国模式培养物保藏所(ATCC)。siNEAT1及阴性对照siNC稳转干扰细胞系、NEAT1、GAPDH及miR-331引物均由上海吉玛制药技术有限公司设计完成。DMEM/F12培养基(D8900)，DMEM培养基(D777)，1640培养基(R6504)， L15培养基(L4386)均购自Sigma；SYBR Green 荧光定量PCR 检测试剂盒(QPK-201)于TOYOBO采购；双荧光素酶报告基因检测试剂盒(RG027)采购自碧云天；X射线生物辐照仪购自Thermo；Trizol reagent(9009)采购自TaKaRa；Matrigel基质胶(356234)采购自BD。苏净Airtech超净工作台；SANYO MCO-15AC细胞培养箱；Nikon Ti-U/Ti-s倒置荧光显微镜；5810R 型高速离心机；Roche R480实时荧光定量PCR仪 ......