潘文星 余云明 阳兴 周文 李洪军

    心肌缺血-再灌注(ischemia reperfusion，I/R)损伤是指心肌在短暂缺血时呈现形态、功能及代谢障碍，而恢复血流灌注后出现的心肌细胞超微结构改变、心律失常、微血管内皮细胞损伤等一系列损伤加重的现象[1]。内皮细胞在维持血管正常功能中起关键作用，而I/R能够通过多种机制诱导血管内皮功能障碍，促进缺血性心脏病、急性心肌梗死等多种心血管疾病发展[2,3]。此外，有研究发现，心肌I/R损伤的发生常伴随着局部或全身的炎性反应，并且与Toll样受体(Toll-like receptors，TLR)4、核因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)密切相关[4,5]。硫喷妥钠(Thiopental Sodium)是一种超短时作用的临床静脉麻醉药，具有作用快、呼吸道并发症少、诱导期短等特点[6]。本研究通过构建大鼠心肌I/R损伤模型，应用qRT-PCR、Western blot和ELISA法，观察了硫喷妥钠对I/R损伤模型大鼠心肌组织TLR4、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)释放的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料 健康雄性SD大鼠20只，体重250～300 g，购自中国科学院上海实验动物中心[合格证号：SCXK(沪)：2016-0006]；Neoseptin 3购自杭州光远生物技术有限公司；一抗、HRP标记的二抗购自Abcam公司；TNF-αELISA试剂盒、IL-1β ELISA检测试剂盒购自武汉艾美捷科技有限公司；TaKaRa反转录试剂盒、TaKaRa实时荧光定量试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司；Trizol试剂、BCA试剂盒、PVDF膜、RIPA裂解液购自北京Solarbio公司；实时荧光定量引物由北京六合华大基因有限公司合成；RT-PCR仪、凝胶成像系统、购自美国Bio-Rad公司；微量核酸测定仪购自美国赛默飞世尔科技公司；生物技能实验系统购自成都泰盟有限公司；微型动物呼吸机购自上海奥尔科特生物公司 ......